免疫熒光技術(shù)的實驗步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹：

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抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
phospho-Cyclin E(Thr395)  磷酸化周期素E連翹苷2,2′-聯(lián)吡啶-5,5′-二羧酸Human CaSR (Calcium Sensing Receptor) 檢測試劑盒

phospho-Cyclin E(Thr62)  磷酸化周期素E蛇床子素甲基烯酸2-乙磺酸酯鹽(SSEM)Human CACYBP (Calcyclin Binding Protein) 檢測試劑盒

Cyclin F  周期素F姜黃素4-羧基酸頻哪酯Human CALD (Caldesmon) 檢測試劑盒

Cyclin G  周期素G歐前胡素4-羧基酸頻哪酯Human MSR1 (Macrophage Scavenger Receptor 1) 檢測試劑盒

Cyclin H  周期素H異歐前胡素N-Fmoc-N'-*基-D-天冬酰胺Human CAM (Calmodulin) 檢測試劑盒

Cystatin 3/CST3  胱抑素C/半胱氨酸蛋白酶抑制劑C1，8—二羥基葸醌N-Fmoc-N'-*基-D-天冬酰胺Human CNX (Calnexin) 檢測試劑盒

Cytoglobin  細(xì)胞球蛋白云南白藥對照品2,6-二氟甲酰胺Human CRT (Calreticulin) 檢測試劑盒

CYLD  微管結(jié)合蛋白CYLD沒食子酸2,6-二氟甲酰胺Human CR (Calretinin) 檢測試劑盒

環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白Porcine PA-IgM (Plaet Associated Aibody) 檢測試劑盒

酪蛋白激酶1γ1Porcine TRF (Transferrin) 檢測試劑盒

21號染色體開放閱讀框88Porcine CX3CL1 (Chemokine C-X3-C-Motif Ligand) 檢測試劑盒

21號染色體開放閱讀框54Porcine P12 (Caspase 12) 檢測試劑盒

細(xì)胞周期檢測點激酶2Porcine TGF-β3 (Transforming Growth Factor β3) 檢測試劑盒

周期素依賴性激酶9Porcine NF-κB p65 (Nuclear Factor-κB p65) 檢測試劑盒

細(xì)胞分裂周期蛋白6Porcine OCLN (Occludin) 檢測試劑盒  

細(xì)胞周期調(diào)控因子34Porcine MIgA (Membrane IgA) 檢測試劑盒
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白104抗體黃曲霉Porcine PRI (Placeal Ribonuclease Inhibitor)  Kit

生孢梭Porcine Methylase  Kit

東京根霉Porcine NAGLU (N-Acetyl Alpha-D-Glucosaminidase)  Kit

金頂側(cè)耳Porcine IL-19 (Ierleukin 19)  Kit

谷氨酸棒桿Porcine PXR (Pregnane X Receptor)  Kit

淡紫青鏈霉Porcine C4 (Compleme Compone 4)  Kit

亞羅克魯維酵母Porcine AGT (Angiotensinogen)  Kit

費氏中華根瘤Porcine PS (Plasma Aicoagula Protein S)  Kit