您好, 歡迎來(lái)到儀表網(wǎng)! 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>單克隆抗體制備的基本過(guò)程
單克隆抗體制備的基本過(guò)程如下:
1、用抗原免疫小鼠;
2、從抗原免疫過(guò)的小鼠獲取脾細(xì)胞;
3、應(yīng)用細(xì)胞雜交技術(shù)使骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合,得到雜交瘤細(xì)胞。這種細(xì)胞不僅能夠像B淋巴細(xì)胞一樣合成性質(zhì)穩(wěn)定的轉(zhuǎn)移性抗體,而且能夠像骨髓瘤細(xì)胞一樣無(wú)限復(fù)制,這樣就可以產(chǎn)生大量且性質(zhì)專一的鼠源抗體;
4、對(duì)獲得的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行篩選,選出能分泌高效價(jià)抗體的雜交瘤;
5、對(duì)已篩選出的單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行鑒定和克隆。
雜交瘤產(chǎn)生的單克隆抗體在各個(gè)領(lǐng)域中應(yīng)用越來(lái)越廣,有很大的優(yōu)點(diǎn)和潛力。能夠根據(jù)需要進(jìn)行研發(fā)生產(chǎn),可建立穩(wěn)定的細(xì)胞株持續(xù)供給應(yīng)用,相比于抗血清能夠減少大量的動(dòng)物和費(fèi)用,而且純度高,均一性好,可作為一種標(biāo)準(zhǔn)試劑。
在獲得能分泌高效價(jià)抗體的雜交瘤細(xì)胞株后,一般有兩種方法來(lái)獲得單克隆抗體:小鼠腹腔注射雜交瘤細(xì)胞和細(xì)胞培養(yǎng)。
1)、小鼠腹水:
將雜交瘤細(xì)胞接種到小鼠的腹腔,雜交瘤在腹腔內(nèi)增殖,取得腹水進(jìn)行純化即可得到抗體。此法易于操作,重復(fù)性高,且花費(fèi)少,得到的抗體量多,但傷害動(dòng)物,而且當(dāng)需要大規(guī)模制備抗體時(shí)需要大量動(dòng)物。
2)、細(xì)胞培養(yǎng):
將雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)后的上清液中即含有抗體。這種方法適合大規(guī)模生產(chǎn)抗體。但是這種方法獲得的抗體雜質(zhì)相對(duì)較多,因?yàn)榧?xì)胞上清含有培養(yǎng)液,pH指示劑,細(xì)胞代謝廢物等。而且培養(yǎng)用的血清中的成分不明確,可能會(huì)含有能影響抗體純度的雜蛋白。所以在細(xì)胞培養(yǎng)中會(huì)逐漸將雜交瘤細(xì)胞通過(guò)逐步減少血清來(lái)馴化到無(wú)血清培養(yǎng)。
總之,單克隆抗體的高特異性,重復(fù)性使其在生物研究以及醫(yī)藥方向都有良好的應(yīng)用基礎(chǔ)以及前景。
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購(gòu)買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。