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其它elisa試劑盒安全性步驟方法

時間:2020/10/21閱讀:246
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其它elisa試劑盒使用步驟:

1.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內配制),酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時。

3.棄去孔內液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。

5.棄去孔內液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。

6.每孔其它elisa試劑盒加底物溶液100μl,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據實際顯況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當標準孔出現明顯梯度時,即可終止)。

7.每孔加終止液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀電源,預熱儀器,設置好檢測程序。

9.實驗完畢后將未用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束。

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其它elisa試劑盒安全性:

1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。

2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

4. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

5. 其它elisa試劑盒中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。

6. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

9. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

10. 底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

11. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

12. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。 

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