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公司動態

抗體貯存訣竅,生物化學試驗*

閱讀:86發布時間:2017-8-10

抗體因為性質和所運用的貯存條件不同,其存儲的“保質期”可能從幾周到幾年不等。雖然每個抗體存儲的條件是共同的,但仍是能夠總結出一些關于抗體存儲建議和一般原則。
一:低溫對抗體的保存至關重要
一般來說,抗體存放在≤4℃的清潔,滅菌的玻璃或塑料管。貯存在室溫下一般會因為微生物的成長導致抗體退化和/或失活。抗體貯存液放在4℃環境中1天或許幾周內其活性不會遭到明顯影響。別的,抗體中能夠參加終濃度為50%的甘油或乙二醇貯存于-20℃。一般我們為了避免重復凍融,能夠分裝抗體。還能夠參加抗微生物藥物(如*或硫柳汞)以避免微生物的成長。帶有符號的抗體一般能夠在甘油或乙二醇中于-20℃保存1-2年。但是,在冷凍保護劑的污染物可能會影響酶的活性。
一些研究人員發現多克隆抗體在血清中于-20℃保存十年其活性丟失不大。但是,一旦抗體被純化后,貯存在50%的甘油中于-20℃保存,即使沒有凍融,其活性的丟失也能夠觀察到,雖然其進程依然十分緩慢。單克隆抗體能夠用兩種方法保存:*,保存在50%的甘油存放于-20℃;第二,也是比較好的方法,將其保存在飽滿硫酸銨于4℃或-20℃(4℃更好)保存。在大多數情況下,凍干的抗體是存放在-20℃。
二:向抗體貯存液中參加抗氧化劑是避免抗體因氧化失效的關鍵步驟
氧化反響是某些酶,尤其是巰基酶的共同問題。為了避免氧化反響對抗體的損壞,我們能夠向抗體中參加一些還原劑(如二硫蘇糖醇(DTT)或 巰基乙醇(2-ME))。試驗證明:越高的pH環境和溫度,有酶活性的抗體的保存時刻越短。此外,參加0.1mM的銅離子,其氧化率添加;而參加金屬螯合劑EDTA可添加有效期。
三:蛋白質安穩劑和抗生素對抗體的安穩貯存發揮著重要作用
蛋白質安穩劑能夠延伸大多數蛋白質在4℃或-20℃的保質期。而25-50%的甘油或乙二醇等防凍劑有助于安穩抗體,避免在-20℃環境中形成冰晶,避免其損壞蛋白質的結構。蛋白酶按捺劑的參加能夠避免抗體發作水解反響導致其失活。而抗微生物藥物,如終究濃度在0.02-0.05%(W / V)的*(NaN3的)或終濃度為0.01%(W / V)的硫柳汞能夠按捺微生物的成長。


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