一、挑選試劑
挑選質(zhì)量的檢查試劑，嚴(yán)格依照試劑闡明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
二、加樣
也許因素：
1）血清或血漿標(biāo)本別離欠好即進(jìn)行加樣; 2）手藝操作中，加樣板過多形成加樣后放入孵箱前等待時(shí)刻過長(zhǎng)（特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)）; 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺起孔外。
三、 孵育
也許因素：
1） 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸騰，吸附于孔壁，難于清洗*; 2） 孵育時(shí)刻人為延伸，致使非特異性緊附于反響孔周圍，難以清洗*。
解決辦法：
1） 貼封片或加蓋; 2） 按闡明過程嚴(yán)格控制操作時(shí)刻。
四、洗板
也許因素：
1） 選用手藝洗板，孔與孔之間液體穿插。 2） 選用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量缺乏，致使洗板不*;洗板針阻塞，抽吸不*;洗板不暢，致使洗板作用差。 3） 反響板過多形成洗板等待時(shí)刻長(zhǎng)。
解決辦法：
1） 保證洗液注滿各孔，洗板針疏通，洗完板后在吸水紙（挑選干凈、無或少塵的吸水資料）上輕輕拍干; 2） 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
五、顯色
也許因素：
1） 顯色劑制造后放置時(shí)刻過長(zhǎng)或運(yùn)用過期顯色劑; 2） 加顯色劑時(shí)濺起孔外形成液體回流。
解決辦法： 1） 顯色劑盡量在臨用前制造，堅(jiān)持不期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不必; 2） 加樣時(shí)保持顯色劑不外流; 3） A、B液應(yīng)防止觸摸金屬器械。
六、停止
也許因素如加停止液時(shí)發(fā)生較多氣泡，致使假陽性添加。所以在加停止液時(shí)應(yīng)防止發(fā)生氣泡。
七、讀板
如讀板時(shí)板底不清洗等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清洗。所以在全部操作過程中保證酶標(biāo)板不觸摸次氯酸; 盡也許完成ELISA檢查標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有用進(jìn)步檢查質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了挑選試劑外，有必要嚴(yán)格依照操作過程進(jìn)行操作，一起作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以謹(jǐn)慎的工作作風(fēng)檢查每一份標(biāo)本，才干保證檢查質(zhì)量。如今國內(nèi)已有適當(dāng)數(shù)量的單位具有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這關(guān)于完成ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢查、進(jìn)步檢查質(zhì)量起到了重要作用。
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