ELISA試劑盒加樣的優化：
在這一過程中，一般情況下有三次加樣，它們分別是加標本，加酶聯絡物，加底物。
小分子抗原比如多肽以及一些小分子有機化合物，由于分子量太小，一般難于直接吸附在酶標板上，一般都先使其與無關蛋白質，比如BSA等偶聯，偶聯物吸附于固相載體上。
凍住血清融解后，蛋白質有些濃縮，散布不均，應充沛混勻宜輕緩，防止氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上劇烈振蕩。
也可在板孔中參與稀釋液，再在其參與血清標本，然后在微型轟動器上轟動1分鐘以確保混和。
一般說來，在5天內測定的血清標本可放置于4℃，逾越一星期測定的需低溫冰存。
ELISA試劑盒包被條件的優化：
包被液的選擇：一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液，假設包被的抗原在堿性條件下不穩定的話，也可以使用pH7.2的磷酸鹽緩沖液。
制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只需待血清天然凝結、縮短后即可取得。
包被濃度的選擇：包被的zui適濃度隨固相載體和包被物的性質改變，一般蛋白質的包被濃度為1-5ug/ml，要明晰關于特定包被抗原的zui適包被濃度需求經過實驗來判定。
包被溫度的選擇：一般是4-8度條件下放置一個黑夜或許37度保溫2小時，我們劇烈主張4-8度條件下包被，有利于蛋白活性的堅持。
ELISA試劑盒包被抗原的選擇：可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類。
