ELISA試劑盒使用方法一
間接法
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜；
次日洗刷3次；
加底物液顯色：于各反應孔中參與暫時制造的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
次日，棄去孔內溶液，用洗刷緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗刷，下同）。
間斷反應：于各反應孔中參與2M硫酸0.05ml。
加一定稀釋的待檢樣品（不知道抗體）0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗刷；
（一同做空白、陰性及陽性孔對照）于反應孔中，參與新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml；
37℃孵育35-60分鐘，洗刷；
畢竟一遍用DDW洗刷。
ELISA試劑盒使用方法二
雙抗體夾心法
包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。
加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗刷。（一同做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。
加酶標抗體：于各反應孔中，參與新鮮稀釋的酶標抗體（經滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗刷。
效果斷定：可于白色布景上，直接用肉眼查詢效果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，根據所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號標明。
ELISA試劑盒也可測OD值
在ELISA查看儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規矩的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
