ELISA試劑盒中通常有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶聯(lián)絡(luò)物,加底物。
加標(biāo)本通常用微量加樣器,按規(guī)矩的量參與板孔中。
每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,以發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。
有此測定(如間接法ELISA)需用稀的血清,可在試管中按規(guī)矩的稀釋度稀釋后再加樣。
也可在板孔中參與稀釋液,再在其參與血清標(biāo)本,然后在微型轟動器上轟動1分鐘以確?;旌?。
單克隆抗體的運(yùn)用使測定抗原的ELISA試劑盒前進(jìn)到新水平。
ELISA試劑盒這種雙位點(diǎn)一步不但簡化了操作,縮短了反應(yīng)時(shí)間,如運(yùn)用高親和力的單克隆抗體,測定的敏感性和特異性也顯著前進(jìn)。
加酶聯(lián)絡(luò)物運(yùn)用液和底物用液時(shí)可用定量多道加液器,使加液進(jìn)程迅速結(jié)束。
在雙抗體夾心法測定抗原時(shí),如運(yùn)用關(guān)于抗原分子上兩個(gè)不一樣抗原決定簇的單克隆抗體別離作為固相抗體和酶標(biāo)抗體。
加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留心不可濺起,不可發(fā)生氣泡。
ELISA試劑盒則在測守時(shí)可使標(biāo)本的參與和酶標(biāo)抗體的參與兩步并作一步。