抗原，ELISA試劑盒是指能在體內引起免疫反響的物質；某一物質能否成為抗原，首先是由它本身的某些性質決議的。抗原的純度不高，特異性不強；組成抗原一般為多肽片段，缺少天然抗原所具有的立體結構表位，親和力不高，可能導致相應表位的抗體漏檢：基因重組抗原具有安全、特異性強、親和力高、產量大等特色，是一種比較抱負的抗原，但其純化比較波折。熒光和化學發光測定的敏感度均高于比色測定，規范曲線的線性范圍亦較比色反響寬，測定作用優于常用的比色ELISA試劑盒，抗體在ELISA試劑盒中運用的抗體可分為多克隆抗體(多抗)和單克隆抗體(單抗)。在運用雙單抗一步法時，應留意抗原過剩時的“鉤狀效應”。而單抗僅針對抗體的單一表位，親和力和特異性均較多抗高，且制備技術老練，產量大，批間差異小，但結合位點的單一也正是其缺點之地點，在雙抗體夾心法中，如包被和指示抗體運用同一單抗，則因為結合位點的缺少，尋常造成假陰性成果。多為體外的蛋白、病菌等各類物質，椰油機體本身的，如本身免疫缺點病癥會對本身發生免疫。多抗取白免疫動物的抗血清，制備較簡略，但抗血清成分復雜，除含針對抗原(多個表位)的抗體外，還含有多種其他抗體，親和力和特異性相對要低于單抗，且制備周期長，批間差異較大。主要有3類，即自然抗原、人工組成抗原和基因重組抗原。抗原在ELISA試劑盒中運用的抗原要求有較高的特異性、親和力和純度。
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