ELISA實驗看似簡略,其實不然。記住從前一個同學*次做ELISA實驗,跟我說,ELISA實驗簡直太簡略了,到第2次在次做ELISA實驗的時分,他驚奇了,說效果不同怎樣這么大(同一份標本),第三次的時分,他抉擇仔細的做一次,搶奪做到同一份標本,這次讓他感受到ELISA并不是那么簡略,發覺其實挺難的。今日的文章中為我們敘說一些ELISA實驗中的小技巧,希望對我們有所協助!
1.操作前應對實驗的物理參數有充分的了解,如環境溫度(保持在18C~25℃)、反應孵育溫度和孵育時間、洗刷的次數等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。
2.正確運用加樣器加樣器應垂直參與標本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應孔壁上,加樣器吸頭要清洗潔凈,避免污染,加樣次第要與說明書一起,否則可導致效果差錯,實驗重復性差。
3.手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,洗刷次數不要超越說明書*的洗刷次數,洗液在反應孑L內逗留的時間不宜太長。不要使洗液在孑L間竄流,構成孔問污染,導致假陰性或假陽性。
4.要保證加液量一起ELISA試劑盒我們在運用時感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量禁絕,構成顯色不一致,判別差錯。
5.顯色液量不可過多加樣的工作環境不能處于陽光直射的環境下,加顯色系統后要避光反應,顯色液量不能過多,避免顯色過強。
ELISA試劑盒的影響要素應選用有國家批準文號,質量靠得住的產品,不能圖廉價,忽視質量保證。試劑應妥善保存于4℃冰箱內,在運用時先平衡至室溫,不同批號的試劑組分不宜穿插運用。試劑打開后要在一周內用完,剩余的試劑下次用時應先查看是否蛻變,顯色劑如被污染變色將構成悉數顯色,導致差錯效果。
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