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ELISA試劑盒實驗結果的差別

時間:2016-10-12閱讀:289
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   ELISA試劑盒中載體的材料很多,zui常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強的吸附蛋白質的性能,從而削弱蛋白質與固相載體的結合,抗體或蛋白質抗原吸附其上后仍保留原來的免疫學活性,加之它的價格低廉,所以被普遍采用。聚苯乙烯為塑料,可制成各種形式。

(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
(2)酶標記的抗原或抗體(結合物);
(3)酶的底物;
(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制血清(定量測定中);
(5)酶聯物(結合物)及標本的稀釋液;
(6)洗滌液;
(7)酶反應終止液。

   ELISA試劑盒每一批號的板在使用前須事先檢查其性能。常用的檢查方法為:以一定濃度的人IgG(一般為10ng/ml)包被ELISA板各孔,洗滌后每孔內加入適當稀釋度的酶標抗人IgG抗體,保溫后洗滌,加底物顯色,終止酶反應后,分別測每孔溶液的吸光度。

   ELISA試劑盒控制反應條件,使各孔讀數在吸光度0.8左右。從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20,其濃度可在0.05%-0.2%之間,高于0.2%時,并借助于親水基團和水分子的結合作用,使蛋白質回復到水溶液狀態,可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度。

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