人5酶聯免疫分析試劑盒實驗原理
  本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人5(5-HT)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入  5與 HRP標記的  5 (5-HT)抗體 ，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在   HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的 5 (5-HT)呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光(5-HT)。用純化的5(5-HT)，再度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人5(5-HT)濃度。

操作步驟

1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl，

溫育：用封板膜封板后

37℃溫育30分鐘。
30倍稀釋后備用
配液：將 30倍濃
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜
重復 5次，拍干。
30秒后棄去，如此
加酶：每孔加入酶標試劑 50µl，空白孔除外。
溫育：操作同 3。
人5酶聯免疫分析試劑盒洗滌：操作同 5。
顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
10分鐘.
10.終止：每孔加終止液    50µl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。測定應在加終止
液后 15分鐘以內進行。
注意事項
1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未
用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有
析出，稀釋時可在浴中加溫助溶，洗滌時不影響
。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在 5分鐘內，如標本數量多，*使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本  OD值
大于標準品孔*孔的 OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計
算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
人5酶聯免疫分析試劑盒保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個月