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人細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)elisa試劑盒

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更新時間:2018-03-24 06:14:14瀏覽次數:138次

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人細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)elisa試劑盒 用途:ELISA法定量測定血清、血漿、細胞培養上清或其它相關生物液體中的含量。科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷

人細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)elisa試劑盒 標本收集:

1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集血液的試管應為一次性的無熱原,無內毒素試管。

2.血漿:抗凝劑*使用EDTA,標本采集后30分鐘內于 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,高血脂標本。

3. 其它生物標本:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測

4. 標本應清澈透明,懸浮物應離心去除。

5.標本收集后若不及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20/-80電冰箱內,避免反復凍融,1-6月內檢測,4保存的應在1周內進行檢測。

6. 如果您的樣本中檢測物濃度高于標準品zui高值,請根據實際情況,做適當倍數稀釋(建議先做預實驗,以確定稀釋倍數)。

ELISA測定中影響測定成敗zui為關鍵的一個因素。ELISA作為一種固相免疫測定,抗原抗體的結合反應在固相上進行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結合,必須在一定的溫度條件下反應一定的時間。溫育所需時間與溫度成反比,即溫度越高,則所需時間相對較短。zui為常用的溫育溫度有37和室溫,其次是4328
溫育這一步是臨床ELISA測定中zui容易出現問題的步驟。通常目前國內ELISA商品試劑盒的反應溫育時間為37 30分鐘~1小時,elisa試劑盒則通常為37 12小時才能有較*的結合,低于1小時,可能會影響測定下限。因此,關于溫育,在實際測定操作中一定要注意以下幾點:
(1)要保證在設定的溫度下有足夠的反應時間。一般來說,加完樣本和/或反應試劑后,將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時,孔內溫度從室溫升至37,需要一定的時間,尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態下,這段升溫時間可能還比較長,而在臨床實驗室中,很少有人注意這個問題,通常是將微孔板一放入溫箱即開始計時,這樣就很容易造成實際測定中溫育時間不夠,弱陽性樣本測不出來的問題。曾有一地處南方的血站同行提出了一個問題,就是在每一年的冬季總有那么一個多月的時間,在做HBsAg測定的室內質控中,測定由衛生部臨床檢驗中心供應的1 ng/ml弱陽性樣本時,總是測不出來,不知原因為何?這可能就與南方冬天室內溫度較低有關,此時微孔板轉入溫箱后37溫育時間不夠,以致弱陽性樣本測定為陰性。因此,為保證37下足夠的溫育時間,臨床實驗室可自行確定本實驗室不同季節(不同室溫下)微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長時間孔內溫度才能達到37,從而適當延長板條在溫箱中的放置時間。具體的做法是,用一小溫度計放置板孔反應溶液中測量觀察即可。

(2)溫育溫度的選擇。在人細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)elisa試劑盒elisa試劑盒的說明書中,指出溫育溫度可有兩種,例如,一種是371小時,另一種則為4345分鐘。從免疫測定的抗原抗體反應的本質來看,在較低的溫度下反應較長的時間zui為*。如28下反應24小時。較高的反應溫度,由于分子運動的加憐惜,反應時間縮短,這一點對分子含量較多的強陽性樣本的測定沒有問題,但對分子含量少的弱陽性樣本則有漏檢的可能。因此,我們建議在臨床ELISA測定中盡量使用較低溫育溫度較長反應時間的條件。

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