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小鼠磷酸化細胞外信號調節激酶elisa試劑盒

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所  在  地上海市

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更新時間:2018-01-13 05:12:17瀏覽次數:163次

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試劑盒名稱:小鼠磷酸化細胞外信號調節激酶elisa試劑盒

英文名稱:Mouse phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK elisa Kit

規    格:96T
保存條件:2-8℃

自備材料:
1. 蒸餾水。

2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3. 振蕩器及磁力攪拌器等。

4.  標準規格酶標儀。

5.  7℃恒溫箱。

實驗步驟:
1.分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準品孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品孔中加入標準品50μl;在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。人雌激素(E)每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。輕輕晃動混勻,37℃溫育60分鐘。
2.棄去液體,甩干,每孔加滿稀釋后洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。如此重復5次,拍干。
3.人雌激素(E)每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
4.取出酶標板,每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
5.人雌激素(E)測定:以空白孔調零,在450nm波長下測量各孔的吸光度值(OD值)。?測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
6.根據標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程,人雌激素(E)再根據樣品的OD值在回歸方程上計算出對應的樣品濃度。也可以使用各種應用軟件來計算。應記住由于樣品稀釋了的,其實際濃度應該乘以總稀釋倍數。

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