小白兔,白又白,兩只耳朵豎起來!萌萌的小白兔有萌化到你的心了嗎?今天上海滬鼎為大家推薦我司 BIM品牌:兔熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒。
實驗原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被兔熱休克蛋白27(HSP-27)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔熱休克蛋白27(HSP-27)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
試劑盒組成:
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標板 | 8孔×12條 | 8孔×6條 | 無 |
標準品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 無 |
樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
自封袋 | 1個 | 1個 | 無 |
在技術在上述方面表現出如下*性:
1、靈敏度高
雖然酶活性調節Elisa方法的靈敏度目前并不十分理想,但在酶活性放大Elisa中,檢測的靈敏度遠比RIA高。根據質量作用定律。即免疫反應所形成的免疫復合物量與反應物濃度成正比。推測所檢測的待測物分子數為1。已知1個摩爾濃度含6.02×1023個分子,那么理論推測酶活性放大Elisa方法的zui低檢測限可達1.7×10-24mol/L。雖然在實際應用中由于反應條件和試劑純度以及儀器精度等因素的影響,往往達不到這個水平(大于104個分子),但表明Elisa在靈敏度方面的改進潛力是很大的。
2、特異性強
從免疫反應的角度來說,Elisa與RIA的特異性應該是一致的。但在Elisa方法中,由于作用檢測指示劑的酶與其底物的反應有專一性,從而增加了該方法的特異性。
3、對儀器設備要求不高,測定成本低
Elisa測定在普通實驗室便可進行,常用的儀器設備包括加樣器、培養箱、酶標讀數器等。按現有價格折算,酶標儀的價格只及液閃儀的1/6至1/4,因此每測定一個樣本所需成本不及PIA的1/10至1/16。某些定性Elisa方法,還可在野外進行,操作十分方便。
4、方法快速、簡便
均質酶免疫測定方法操作時,所有反應試劑均在同一體系內進行,不需任何分離步驟,操作十分簡便、快速,數分鐘便能得出結果。
5、試劑保存時間較長
作為檢測指示劑用的酶和酶標記物,在低溫或干燥條件下相對穩定,可保存半年至數年之久。
6、自動化程度高
Elisa由于不存在放射性同位素污染,因此,除加待測樣本需要人工操作外,其他各步驟均可用儀器自動化完成。在這種自動化條件下,平均每人每天可完成2000余個樣本的檢測工作。
7、方法種類多
Elisa技術可以充分利用單克隆抗體的優點,并能利用某些非免疫反應試劑(如SPA、凝集素等)的作用,發展成為許多新方法。此外,發展Elisa技術還可以從酶及其底物兩方面著手。這是因為:*,用于Elisa技術的酶其種類遠遠多于可用作RIA檢測指示劑的放射性同位素。生物界的酶多種多樣,有希望開發很多類型的酶用于Elisa,并建立相應的Elisa方法。相反,自然界的化學元素是有限的,放射性同位素的種類更加有限。第二,由于酶的多樣性,酶作用底物也有多種多樣,與此相對應的生色源或供氫體的種類也有遠大的開發和發展潛力。
8、無放射性同位素污染
Elisa技術應用酶促反應作為檢測免疫反應強度的依據,在終端測定中毋須接觸放射性同位素,根本不存在放射性污染問題(某些為提高檢測靈敏度而建立的酶免疫放射底物方法除外)。
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