CIK 細胞輸注聯合 TACE 治療延緩原發性肝癌患者門靜脈癌栓的形成
                     宋海燕，劉 波，張駿飛，董 靜，郭 遠，劉利偉，陳從新

【摘要】 目的 探討細胞因子誘導的殺傷細胞（CIK）輸注聯合經動脈插管化療栓塞術（TACE）治療原發性肝癌患者延緩門靜脈癌栓形成的可能性。方法 選擇 2010 年 1 月～2014 年 12 月我院收治的原發性肝癌患者 44 例， 22 例接受 TACE 聯合CIK 細胞輸注治療，另 22 例只接受 TACE 治療。采用Ficoll 兩步分離法分離外周血單個核細胞，經 IFN-γ、抗 CD3 單克隆抗體和 IL-2 誘導，使用流式細胞儀檢測細胞 CD 抗原表達鑒定 CIK 細胞培養成功， 常規行 TACE 治療，在 TACE 治療半月后輸注 CIK 細胞懸液 3 次，細胞總數為 1.0×109。治療前后行腹部 CT 檢查， 確定門靜脈栓子形成情況。結果 治療后 1  m、3  m 和 6 m，聯合組患者門靜脈癌栓發生率分別為 4.5%、13.6%和27.2%，而 TACE 組則分別為 9.0%、45.5%和 63.6%（P<0.05）；在治療 3 月時，聯合組腫瘤大小為（4.77±1.27）cm，顯著低于 TACE 組（[  5.54±1.14）cm,P＜0.05]；在治療 3 月時，聯合組血清甲胎蛋白水平為(83.14±31.91)  ng/ml，也顯著低于 TACE 組[(139.24±98.76)  ng/ml，P＜0.05]；兩組肺部、顱腦和骨骼等遠處轉移發生率無顯著性差異（P>0.05）。結論 CIK 細胞輸注聯合 TACE 可明顯減緩原發性肝癌患者門靜脈栓子形成的時間，改善肝功能，同時能有效控制腫瘤的生長及擴散。
【關鍵詞】 原發性肝癌；門靜脈癌栓；細胞因子誘導的殺傷細胞；過繼免疫療法；經動脈插管化療栓塞術
種常見的類型。因癌栓形成后明顯增加了上消化道出血的風險，給進一步治療帶來難度。因此，預防癌栓形成尤為重要。對于伴有門靜脈栓子形成的肝癌患者，能耐受手術者應shou選手術剝除治療，并可在此基礎上經肝動脈或門靜脈置管灌注化療，這是目前比較理想的治療方法。還有其它一些微創治療方案，如超聲微波消融、放療及門靜脈內置支架等。這些治療方法的共同缺點是無法防止腫瘤復發和轉移。近年來，有學者采用細胞因子誘導的殺傷細胞
（Cytokine-induced  killer  cells，CIK）輸注，作為一種全身治療方法，可能會達到防止肝癌轉移或控制遠處轉移灶發展的效果[2～4]。本研究采用 CIK 輸注聯合經動脈插管化療栓塞術 (Transcatheter arterial chemoembolization, TACE) 治療原發性肝癌患者，觀察治療后門靜脈癌栓形成及肝內腫塊大小變化情況，發現該聯合治療能有效控制腫瘤生長，并明顯降低門靜脈癌栓的發生率。
1資料與方法
1.1 一般資料 自 2010 年 1 月～2014 年 12 月我
院收治的原發性肝癌患者 44 例，男性 41 例，女性 3 例；年齡 33～68 歲，平均年齡（42.6±8.3）歲。所有患者診斷符合《原發性肝癌診療規范（2011 年版）摘要》[5] 標準，不伴有門靜脈栓子，同時無 TACE 治療禁忌證者入選。在入選患者中，接受單一 TACE 治療者 22 例，另 22 例在 TACE 治療的基礎上給予靜脈輸注 CIK 細胞懸液治療。治療前，兩組患者各項指標比較均無顯著性差異。伴有門靜脈栓子或其他部位轉移者或有 TACE 治療禁忌證者被除外。
1.2CIK 細胞的分離、純化和培養 采用 Ficoll 兩步分離法分離出外周血單個核細胞，用含血清培養基調整細胞數為 1～5×106／ml，在 37℃，5%CO2培養箱中培養，于培養的第 1 d 加入終濃度為 1000 U/ml 的 IFN-γ(上海滬鼎生物科技有限公司)；第 2 d 加入終濃度為 100 ng/ml 抗 CD3 單克隆抗體［妙通（上海）生物科技有限公司］、1000 U/ ml 的 IL-2
（上海常斤生物科技有限公司），而后每隔 1～2  d加入新鮮的含 1000 U/ml 的 IL-2 *培養液，并調細胞數為 1～5×106/ml，繼續培養、傳代，定期補充抗 CD3 和IL-2。使用流式細胞儀檢測細胞 CD 抗原的表達情況。同時取培養上清行乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、HIV 和梅毒感染標志物檢測，行細菌培養、真菌培養，檢測抗支原體 -IgG 和內毒素水平。

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