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LB培養(yǎng)基的配制,你會嗎?

時間:2020/7/30閱讀:2660
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LB培養(yǎng)基,是微生物學(xué)實驗中常用的培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)大腸桿菌等細(xì)菌,其分為液態(tài)或是加入瓊脂制成的固態(tài)培養(yǎng)基。加入抗生素的 LB 培養(yǎng)基可用于篩選以大腸桿菌為宿主的克隆。
盡管該培養(yǎng)基的名稱被廣泛解釋為Luria-Bertani 培養(yǎng)基,然而根據(jù)其發(fā)明人貝爾塔尼(Giuseppe Bertani)的說法,這個名字來源于英語的 lysogeny broth,即溶菌肉湯。

LB培養(yǎng)基的配制:

成分:
胰蛋白胨(tryptone)10g;酵母提取物(yeast extract)5g

(NaCl)10g;固體培養(yǎng)基另加 瓊脂粉 15-20g

加雙蒸水至1000mL, 用5mol/L NaOH(約0.2ml)調(diào)pH至7.2,121℃滅菌30min

配制方法:
1.稱量 分別稱取所需量的胰化蛋白胨、酵母提取物和NaCl,置于燒杯中。

2.溶化 加入所需水量2/3的蒸餾水于燒杯中,用玻棒攪拌,使藥品全部溶化。

3.調(diào)pH 用1mol/L NaOH溶液調(diào)pH至7.2。

4.定容 將溶液倒入量筒中,加水至所需體積。

5.加瓊脂 加入所需量瓊脂,加熱融化,補(bǔ)足失水。

6.分裝、加塞、包扎。

7.高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。

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