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細胞培養(yǎng)性能

時間:2019/11/26閱讀:751
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    作為上游細胞培養(yǎng)工藝的一部分,TAP Biosystems(Sartorius Stedim Biotech Group的一部分)的ambr250自動生物反應器系統(tǒng)被用于評估葉率輸入對細胞培養(yǎng)性能的影響。

    在系統(tǒng)平臺上的24個生物反應器中,有10個于實驗,評估不同的功率輸入。與標準工藝相比,這個范圍從減少五倍到增加兩倍。

    然后將ambr250的結果與在3L玻璃生物反應器中運行的標準工藝進行比較。這樣的生物反應器在工藝開發(fā)中很常見。

    投資高通量細胞培養(yǎng)技術的一個關鍵考慮因素是建立數(shù)據(jù)以確保生物反應器間的可比性。重要的是,通過臺盼藍檢測的活細胞密度在運行標準工藝的五個ambr250生物反應器重復之間高度一致(圖2A)。基于此,活細胞密度分布在標準工藝和提高的功率輸入工藝之間沒有明顯的差異。

    與3L玻璃生物反應器中的標準工藝相比,這兩個工藝優(yōu)勢明顯。有意思的是,低功率輸入工藝早期與標準工藝具有較好的可比性,但不能支持第11天后的細胞密度(圖2B)。

    補料消耗曲線是細胞培養(yǎng)工藝開發(fā)過程中監(jiān)測和控制的一個重要變量。在此過程中,使用離線分析儀監(jiān)測葡萄糖濃度,ambr250自動機械臂采集生物反應器樣品。通過ambr250內(nèi)置泵及液面下的補料管線將營養(yǎng)物添加到培養(yǎng)物中。

    每個不同工藝的葡萄糖水平在第11天之前是相似的(圖2C)。此時,由于細胞活率下降,低功率輸入條件下的葡萄糖消耗減少。

    使用ambr250時,發(fā)現(xiàn)在比標準工藝低的功率輸入下運行對細胞培養(yǎng)性能具有負面影響。這可能是由于混合、營養(yǎng)輸送受損或由于較低的氧傳遞而導致氣泡剪切增加。無論是單獨還是關聯(lián)的,這些因素可能是ambr250平臺未來試驗的主題。

    另外,發(fā)現(xiàn)在較高功率輸入下運行對細胞培養(yǎng)沒有負面影響,表明細胞對額外的基于攪拌的剪切不敏感。后,ambr250產(chǎn)生的培養(yǎng)環(huán)境與3L玻璃生物反應器產(chǎn)生的培養(yǎng)環(huán)境相當。

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