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ELISA 試劑盒生產流程及注意事項

時間:2019/8/13閱讀:3463
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 一、ELISA 試劑盒生產流程

    二、包被
    1.將包被抗原用包被緩沖液配制包被液,每孔取100mL加入酶標板,蓋好蓋板膜,包被條件如下表,4℃16-20h包被時酶標板可以疊放,而37℃2h 包被時酶標板之間的間距應保持一致(一般為 5cm)。根據培養箱的設計調節酶標板間的間距,如培養箱從底部產熱,則應增加下層酶標板間的間距為10cm 。

    2.包被加樣采取吸二打一的方式,應避免加在孔壁上部,若不慎滴加在孔壁上,根據該滴溶液是否應加入孔內再做判斷,若應加入,則小心振蕩使其落入孔底,反之則用吸水紙小心吸出,并注意不可濺出,不可產生氣泡。

    3.包被前預吸查看槍頭是否合格,水流是否一致,不一致者應更換槍頭,包被應采用槍頭,每包被一塊板,應將槍頭套緊,并且在包被的過程中要注意查看吸液是否一致,在包被過程中若出現任何小問題,都應將此塊板做出記號,以便后期組裝入庫時淘汰。
若采用 37℃ 2h 包被模式,則應給酶標板編碼,保證每塊板子的包被時間一致。

    三、洗板
    1.包被后要進行兩次洗滌,250微升/孔,洗滌完畢后,應在毛巾上拍干參與液體,并及時進行下一步封閉。

    2.洗滌時要注意查看水流是否一致,在洗滌程中若出現任何小問題,都應將此塊板做出記號,以便后期組裝入庫時淘汰。

    四、封閉
    1.封閉液應提前一小時取出初步回溫,用前搖勻,每孔取 180 mL 加入酶標板,蓋好蓋板膜,37℃封閉 1.5h, 酶標板之間的間距應保持一致(一般為 5cm)。根據培養箱的設計調節酶標板間的間距,如培養箱從底部產熱,則應增加下層酶標板間的間距為 10cm 。

    2.封閉加樣采取吸一打一的方式,應避免加在孔壁上部,若不慎滴加在孔壁上,根據該滴溶液是否應加入孔內再做判斷,若應加入,則小心振蕩使其落入孔底,反之則用吸水紙小心吸出,殘留在槍頭內的溶液不要打出 以免產生氣泡。并注意不可濺出,不可產生氣泡

    3.封閉前預吸查看槍頭是否合格,水流是否一致,不一致者應更換槍頭,封閉應采用槍頭,每封閉一塊板,應將槍頭套緊,并且在包被的過程中要注意查看吸液是否一致,在封閉過程中若出現任何小問題,都應將此塊板做出記號,以便后期組裝入庫時淘汰。

    五、烘干裝袋
    1.封閉完后,摔倒孔內液體,并在毛巾上拍干,接下來采取烘干或者晾干的方式*干燥酶標板。烘干:37 ℃倒置(不加蓋板膜或用自封袋),每 5 塊板烘干 30 min,隨著板子數量增多時間相應延長,如 100 塊板,需要烘 3 h,依次類推;晾干:底部鋪一層干凈的 A4 紙或者吸水紙,倒置板子,在頂層鋪一層蓋住避光,室溫晾 18-24h。

    2.板子干燥后,應及時裝入自封袋,按照每塊板 1 袋干燥劑的量裝入,袋子外面寫好板子制備日期,放入本成品庫冷藏環境保存備用。

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