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教您怎么識別高質量的血清

時間:2019/7/23閱讀:2897
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現在市場上的胎牛血清種類繁多,特別是次剛接觸細胞培養的人很難分辨血清質量的好壞,下面上海滬鼎生物科技有限公司來告訴你血清的制作步驟和辨別方法。

    制作動物血清步驟:
    1.采血:達到放血*,應選擇前腔動脈或靜脈放血,注意放血部位的消毒和器具的消毒。

    2.析出血清:采用靜置自然析出方法,將析出的血清收集到經消毒的生理鹽水瓶內,一般裝到生理鹽水瓶容量的三分之二,為了更*的分離血清,過夜后還會有血清析出,繼續收集。
 
    3.殺滅病毒的處理:將收集好的血清,瓶口向上放入水浴鍋56℃水浴2小時,病毒經高溫后失活,而在該溫度時,抗體效價不下降。

    4.殺滅細菌,每毫升加2000單位的鏈霉素和2000單位的青霉素,充分搖均,封口即可使用。
 
    5.存放,不立即使用時,應冷凍保存。

    辨別方法:
    一、外觀
    拿到血清,接觸的是血清外觀,對于缺少細胞培養經驗的人來說,外觀的判斷尤為重要。

    1.顏色
    根據血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現出黃色或紅色,我國的細胞培養用血清標準是不高于20mg/dl,實際上,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響,這個指標的意義在于能體現出采血過程的嚴謹規范程度,良好的操作能降低血清的溶血。國產血清的采血點很分散,大多是由屠戶采血后馬上離心收集,所以很少會有溶血,表現出明亮的蠟黃色,當然,國產血清也很少有標準意義上的胎牛血清。進口胎牛血清或多或少總有點溶血,因為真正的胎牛血清凝血功能差,紅細胞容易破裂。

    2.沉淀
    很多血清客戶,會發現進口血清有沉淀,從而懷疑血清的質量問題,這是沒有根據的。血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產生,對血清質量沒有任何影響,沉淀的產生原因很多,和廠家的加工生產方式密切相關。國產的血清,大多來自北方,由于價格低廉,保存環境都不好,從采血、冷凍、運輸到生產會經過多次凍融,每次凍融過程,就會析出部分纖維蛋白沉淀,這樣,血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈”,很少有沉淀產生。進口的胎牛血清,過濾分裝前很少會反復凍融,生產后的成品也是清澈的,但隨著時間的推移,血清中的大量纖維蛋白會析出形成沉淀。當然,進口的新生牛血清,一般牛齡都在2周左右,血清中的各種蛋白含量明顯偏高,生產后血清可能會渾濁,甚至有大量沉淀。

    3.澄清度
    進口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質含量低,表現為稀薄、清淡,而國產血清,因為絕大多數是新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深,這對于初步接觸血清的人很難判斷,但把兩者進行對比,可容易分辨。

    二、血源
    市場上的血清血源主要分為中國、北美、南美和澳洲。
    1.國產血清質量差,這是*的,主要原因并不是生產廠家的責任,而是天然環境差和抗生素的大量使用。國內環境污染嚴重,同時飼養過程中抗生素極其濫用,有毒有害物質會大量殘留在血清中,終不利于細胞的生長。

    2.南美血清,來源很多,如Bioind的巴拿馬、Gibco的烏拉圭、巴西等,這些血清由于采血的不可控性,質量參差不齊,當然,相對于國內血清來說好的多。另外,國內銷售的南美血清大多顏色鮮紅,如Bioind、Gibco、Hylone等品牌,但阿根廷的血清例外,這可能和各國的采血、生產工藝有關。

    3.北美血清,主要來自美國和加拿大,如Hclone的SH30396、SH30070、SH30071、Gibco的16000-044、26140-079等。這類血清,等級越高的顏色越淡,表現為淡黃中帶一點微紅,SH30070和SH30396對比就很明顯,特級胎牛血清基本就能進行干細胞培養。北美血清還有一個顯著特點就是每瓶血清都能溯源,這對一些大型的疫苗廠、藥廠尤為重要。

    4.澳洲血清,來源主要是新西蘭和澳大利亞,這是在北美血清禁運之后進入中國市場的,一般不具有溯源功能,由于生產、運輸等原因,價格相對來說比較貴。拿Gibco的10099和16000相比較,后者質量等級更高,顏色更淡,性價比更高。

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