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可能有不少朋友都知道“選擇困難戶”這么一說,而在抗體實驗中的選擇也難倒了很多老 師,在面對選擇抗體的時候是否也讓您糾結了很長時間呢?上海滬鼎生物發現可通過樣品性質 選擇抗體。
樣品的性質
1. 希望檢測的蛋白質區域
在免疫原物質刺激下宿主動物發生免疫反應,產生抗體。免疫原物質種類繁多,包括全長 蛋白、蛋白質片段、多肽、整個生物體或細胞。免疫原通常在數據表上有所描述(但有些情況 因專li原因無法提供對免疫原的確切描述)。如果打算檢測蛋白質片段或者全長蛋白的特定異 形體或區域,需要確保所選抗體是用與該片段或區域相同的免疫原制備的或者是用包含于該片 段或區域內的免疫原制備的。如果打算通過FACS檢測活細胞上的細胞表面蛋白,需要選擇由蛋 白的胞外域制備的抗體。
2. 樣品的處理
有些抗體要求樣品用特定方式處理。例如,許多抗體僅能識別已還原和變性的蛋白質,可 能是因為這樣露出了蛋白質折疊形成的二級和三級結構中隱藏起來的表位。另一方面,有些抗 體僅能識別天然、折疊狀態的蛋白質上的表位。(對于要用于蛋白質印跡的Abcam抗體,除非在 數據表上另有說明,否則應使樣品還原和變性)。當搜索用于免疫組織化學的抗體時,應注意 有些抗體僅適用于未固定的冷凍組織,并且如果沒有抗原修復步驟,逆轉福爾馬林固定所引起 的交聯,那么許多其它抗體也不能與福爾馬林固定、石蠟包埋的組織中的靶標結合。這些使用 上的限制會在數據表的應用章節中加以說明。
樣品的物種
所選抗體的抗原物種應與所研究的物種相同。但抗體可與來自其它物種的具有氨基酸序列 高度同源性的相同靶蛋白反應。如果樣品不是來自列出的物種之一,這并非意味著抗體不能檢 測該蛋白質,而是因為物種尚未經過測試,我們難以評價其適用性。可根據序列相似性對交叉 反應性進行預測:值得驕傲的是,Abcam在數據表上提供Expasy和NCBI BLAST鏈接,從而可比較 不同物種間的氨基酸序列同源性。
樣品性質是*選擇抗體方法,具體表現內容已經在上面細細的介紹了一番,如果您不太 明白或者新的產品問題咨詢,您都可以來電給我公司,我們有專業的技術專員,在一個工作日 內給您相應的解決方案。
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