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別把ELISA實(shí)驗(yàn)神化了,做ELISA實(shí)驗(yàn)就是這么簡單!

時(shí)間:2017/12/29閱讀:940
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    酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA) 即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行的技術(shù)。該技術(shù)可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、靈敏、簡便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)。
 

基本原理

    它采用抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng),用于定量測定。測定的對(duì)象可以是抗體也可以是抗原。

   在這種測定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體(免疫吸附劑) ②酶標(biāo)記的抗原或抗體(標(biāo)記物)③酶作用的底物(顯色劑)測量時(shí),抗原(抗體)先結(jié)合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體(抗原)與酶結(jié)合成的偶聯(lián)物(標(biāo)記物),此偶聯(lián)物仍保留其原免疫活性與酶活性,當(dāng)偶聯(lián)物與固相載體上的抗原(抗體)反應(yīng)結(jié)合后,再加上酶的相應(yīng)底物,即起催化水解或氧化還原反應(yīng)而呈顏色。

    其所的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比。 這種有色產(chǎn)物可用肉眼、光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(jì)(酶標(biāo)儀)加以測定。其方法簡單,方便迅速,特異性強(qiáng)。
 

分類
該法由種類和變化可分為以下幾種:
(一)雙抗體夾心法
(二)間接法
(三)競爭法
(四)雙位點(diǎn)一步法
(五)捕獲法測IgM抗體
(六)應(yīng)用親和素和生物素的ELISA

 

特點(diǎn)
 

靈敏性高
該測定法的靈敏度來自作為報(bào)告基團(tuán)的酶。*, 酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng) ,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。ELISA實(shí)現(xiàn)了在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位,或在微克、甚至納克水平上對(duì)其進(jìn)行定量。

 

特異性強(qiáng)
其特異性來自抗體或抗原的選擇性。抗原抗體的結(jié)合實(shí)質(zhì)上只發(fā)生在抗原的抗原決定簇與抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)之間。由于兩者在化學(xué)結(jié)構(gòu)和空間構(gòu)型上呈互補(bǔ)關(guān)系,所以抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性。

 

    上海滬鼎elisa試劑盒準(zhǔn)確度高,靈敏度高,特異性強(qiáng),檢測時(shí)間短,操作非常簡便,安全可靠。含稅含運(yùn)費(fèi),提供免費(fèi)代測及技術(shù)指導(dǎo)。感謝您對(duì)本公司的支持,歡迎您來電與我公司業(yè)務(wù)員洽談。 

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