當前位置:上海滬鼎生物科技有限公司>>技術文章>>滬鼎告訴您如何降低ELISA實驗背景問題
ELISA實驗的原理似乎很簡單,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,間中夾雜著洗滌和封閉。然而,即使是平淡無奇的洗滌和封閉,如果做得不太好,也有可能毀了整個實驗。在實驗結束時,我們是否能獲得有意義的信息,這在很大程度上取決于結果的信噪比。
背景噪音會影響您對結果的判斷,滬鼎告訴您如何降低ELISA實驗背景問題。
1.洗滌
這一步驟看似很無聊,其實很重要,因為如果未結合的材料殘留在微孔板中,那么它會增加背景噪音。如有必要,可增加洗滌液中的鹽濃度,這會阻止非特異結合反應。如果背景過高,而您懷疑洗滌不夠時,可以嘗試增加洗滌次數。
2.優化抗體濃度
如果試劑稍有不同,則可能需要優化抗體的量。非特異的抗體結合會增加背景,為了防止這一點,切勿使用過多的一抗或二抗。
3.封閉到底有多關鍵
封閉液的作用是讓不相關的蛋白占據微孔板中潛在的結合位點。這就降低了可產生信號的抗體非特異結合的機會。如果背景過高,懷疑封閉不充分,那么您可以嘗試使用更高濃度的封閉液,或適當延長封閉時間。
如果您一直被背景問題所困擾,那么也許您該花些時間來優化封閉液。這可能需要時間,但也是值得的。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。