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包被固相載體的抗體應具有高親和力和高特異性,可取材于抗血清或含單克隆抗體的腹水或培養液。
如免疫用抗原中含有雜質,在抗血清中將出現雜抗體,必須除去后才能用于Elisa,以保證試驗的特異性。一般經硫酸銨鹽析粗提的IgG已可用于包被,高度純化的IgG性質不穩定。如需用高親和力的抗體包被以提高試驗的敏感性,則可采用親和層析法以除去抗血清中含量較多的非特異性IgG。腹水中單抗的濃度較高,特異性亦較強,因此不需要作吸收和親和層析處理,一般可將腹水作適當稀釋后直接包被,必要時也可用純化的IgG。
應用單抗包被時應注意,一種單抗僅針對一種抗原決定簇,在某些情況下,用多種單抗混合包被,可取得更好的效果。
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