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ELISA方法是一種特殊的試劑分析測試方法,具有靈敏度高和特異性強的兩大特點:
1、靈敏度高 該測定法的靈敏度來自作為報告的酶。*,酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導大量的催化反應,產生可供觀察的顯色反應現象。因此該體系常被稱為酶放大體系。ELISA實驗實現了在細胞或亞細胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位,或者微克、甚至納克水平上進行定量。
2、特異性強 其特異性來自抗體或抗原的選擇性,抗原抗體的結合實質上只發生在抗原的抗原決定簇與抗體的抗原結合位點之間,由于兩者在化學結構和空間構型上呈互補關系,所以抗原抗體反應具有高度的特異性。
完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:
(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
(2)酶標記的抗原或抗體(結合物);
(3)酶的底物;
(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制血清(定量測定中);
(5)結合物及標本的稀釋液;
(6)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
(7)酶反應終止液,常用的HRP反應終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的zui終體積而異,在板式ELISA中一般采用2mol/L。
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