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小鼠神經細胞瘤與大鼠神經膠質瘤之融合細胞

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更新時間:2016-06-17 21:34:57瀏覽次數:280次

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【細胞凍存】將貼壁細胞消化后離心收集,懸浮細胞直接離心收集,以*培養基或胎牛血清重懸細胞至終濃度約106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中。用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜。次日小鼠神經細胞瘤與大鼠神經膠質瘤之融合細胞保存到液氮中。
A01155 人*型纖溶酶原激活物(uPA/PLAU)ELISA試劑盒 Human urokinase-type plasminogen activator,uPA/PLAU ELISA Kit 96T/48T
A01156 人果糖1,6二磷酸醛縮酶(FDA)ELISA試劑盒 Human Fructose-1,6-bisphosphate aldolase,FDA ELISA Kit 96T/48T
A01157 人組織蛋白酶D(cath-D)ELISA試劑盒 Human cathepsin D,cath-D ELISA Kit 96T/48T
A01158 人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA試劑盒 Human hormone sensitive lipase,HSL ELISA Kit 96T/48T
A01159 人*(PK)ELISA試劑盒 Human pancreatickininogenase,PK ELISA Kit 96T/48T
【細胞株傳代】貼壁細胞:對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
懸浮細胞:一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。
如何選用特殊細胞系培養基?
培養某一類型細胞沒有固定的培養條件。在MEM中培養的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之,*MEM做粘附細胞培養、RPMI-1640做懸浮細胞培養是一個好的開始,各種目的無血清培養*AIM V(12005)培養基(SFM)。
L-*在細胞培養中重要嗎?它在溶液中不穩定嗎?
L-*在細胞培養時是重要的。脫掉氨基后,L-*可作為培養細胞的能量來源、參與蛋白質的合成和核酸代謝。L-*在溶液中經過一段時間后會降解,但是確切的降解率一直沒有zui終定論。L-*的降解導致氨的形成,而氨對于一些細胞具有毒性。
GlutaMAX-I是什么?培養細胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩定?
GlutaMAX-I 二肽是一個L-*的衍生物,其不穩定的alpha-氨基用L-*來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-*供利用。
GlutaMAX-I二肽非常穩定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有zui小的降解,如果在相同條件下,L-*幾乎*降解。
什么培養基中可以省去加酚紅?
酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養基。
酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養基。
如何用臺盼蘭計數活細胞?
用無血清培養基把細胞懸液稀釋到200~2000個/毫升,在0.1毫升的細胞懸液中加入0.1毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻,數分鐘后,用血球計數板計數細胞。活細胞排斥臺盼蘭,因而染成藍色的細胞是死細胞。
A01137 人β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒 Human α-galactosidase,αGAL ELISA Kit 96T/48T
A01138 人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒 Human α-L-iduronidase,IDUA ELISA Kit 96T/48T
A01139 人α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒 Human α2-Antiplasmin,α2-AP ELISA Kit 96T/48T
A01140 人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒 Human N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG ELISA Kit 96T/48T
A01141 人L苯*解氨酶(PAL)ELISA試劑盒 Human L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA Kit 96T/48T
A01142 人5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒 Human 5-Nucleotidase,5-NT ELISA Kit 96T/48T
A01143 人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒 Human 1,3-βD glucosidase,1,3-βD-Glu ELISA Kit 96T/48T
A01144 人靶向核糖核酸酶(TR)ELISA試劑盒 Human targeted ribonuclease, TR ELISA Kit 96T/48T
A01145 人酸性神經鞘磷脂酶(ASM)ELISA試劑盒 Human acid sphingomyelinase, ASM ELISA Kit 96T/48T
A01146 人花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)ELISA試劑盒 Human arachidonate 5-lipoxygenase,ALOX-5 ELISA Kit 96T/48T
A01147 人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA試劑盒 Human 5-lipoxygenase,5-LO/LOX ELISA Kit 96T/48T
A01148 人腺苷酸環化酶1(AC-1)ELISA試劑盒 Human adenylyl cyclase 1,AC-1 ELISA Kit 96T/48T
A01149 人可溶性腺苷酸環化酶(sAC)ELISA試劑盒 Human Soluble Adenylate Cyclase,sAC ELISA Kit 96T/48T
A01150 人*脫羧酶(ODC)ELISA試劑盒 Human Ornithine decarboxylase,ODC ELISA Kit 96T/48T
A01151 人蛋白*激酶(PTK/CD115)ELISA試劑盒 Human protein tyrosine kinase,PTK ELISA Kit 96T/48T
A01152 人蛋白*磷酸酶(PTP/PTPase/CD148)ELISA試劑盒 Human protein tyrosine phosphatase,PTP/PTPase ELISA Kit 96T/48T
A01153 人腫瘤壞死因子α轉化酶(TACE)ELISA試劑盒 Human TNF α converting enzyme,TACE ELISA Kit 96T/48T
A01154 人多形核白細胞彈性蛋白酶(PMN Elastase)ELISA試劑盒 Human Polymorphonuclear Elastase,PMN Elastase ELISA Kit 96T/48T
 

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