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人臍靜脈內皮 (具有T24細胞特性),ECV-304細胞

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更新時間:2016-05-11 01:28:03瀏覽次數:252次

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人臍靜脈內皮 (具有T24細胞特性),ECV-304細胞原代或傳代提供,高活性、無污染(不含原蟲、霉菌、細菌、黑蛟蟲、真菌、支原體等污染物質)。
生長特性:貼壁、懸浮、半貼壁
傳代時間:2-4天/3-5天
傳代比例:1:2-1:3 1:1-1:2

人臍靜脈內皮 (具有T24細胞特性) , ECV-304細胞5×10^5以上/1ml
對于大多數細胞研究工作者來說,人臍靜脈內皮 (具有T24細胞特性) , ECV-304細胞污染那可是個糟糕的事情,也是比較容易出現的情況,我們如何防范,如何避免,是我們要學習和掌握的。
李氏增菌液LB2配套試劑 2×5支 2×5支
PALCAM瓊脂基礎 250g 250g
PALCAM瓊脂配套試劑 10支 10支
德國無比色卡PH試紙 5.0→10.0 5米長/卷,200條/盒
人臍靜脈內皮 (具有T24細胞特性) , ECV-304細胞德國PH試紙(單色) 40922 5米/卷
德國PH試紙(雙色) 1.0-14.0 5米/卷
德國PH試紙(三色) 40919 5米/卷
物料表面檢測PH指示劑 4.0-10.0 100ml/瓶
德國顏色溶液中檢測PH測試條 40922 200條/盒
下面我們對細胞培養中常見的污染情況,做個總結:
1)原蟲:培養液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細小的點狀物數量非常多,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態不好,邊緣不清楚,細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養。這種共生是非常普遍的,但他們的數量小,細胞站優勢所以不會影響到細胞的正常生長,只有當他們到達一定的數量時就會影響到細胞的生長,zui終形成惡性循環。
2)霉菌:培養液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質,37度孵箱培養2-3天,仍清亮,但出現絮狀雜質,鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態變差,用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內,再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅。或者在培養箱的托盤加入飽和的消毒*高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉移,采用過氧乙酸擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把過氧乙酸放置在孵箱內一個小時,使其蒸汽彌漫。待過氧乙酸的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節。其它培養箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預防霉菌污染,可在培養基里加3u/ml的兩性霉素或*或*或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,*或*或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞。,將環境*消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統污染,檢查一下培養基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
3)細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據感染細菌的不同,可有不同的外形,培養液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養液接觸的移液管等物品,連續兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養液是否存在渾濁的現象! 可在培養液中加相應的抗生素處理
4)黑蛟蟲:可以穿透濾膜,也可以通過空氣傳播,低倍下為黑色點狀,高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,培養液也是不渾的,一般不會太影響,細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態良好,且觀測到的運動物無明顯增多,且培養液顏色、透明度無明顯變化,可在同一批號的血清養的細胞中發現類似現象。對細胞生長狀態不會有明顯影響,在細胞增殖旺盛之后會自然消失,除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話,可以增加細胞的種板密度,以提高細胞的生存率。
5)真菌:一般培養液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細胞碎片,只是它很多很多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細胞碎片分不清,慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢,不象細菌那么容易被發現,但是一旦發現有它的存在細胞就被污染了,也很難救活了。
6)支原體:黑色的,好象多為多形,培養液一般培養液一般會渾濁,原體感染,國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測,而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后,細胞病變不很明顯,只是慢慢死去。用泰樂菌素,獸用支原體病的藥,但可用于細胞培養,無任何不良反應。Sigma公司的使用時用50ug/ml Tylosin培養液培養6天或連續傳兩代即可清除支原體污染。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度。
污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環境問題等等關于培養基的無菌狀況,取培養基至培養瓶中(不加細胞),37度試培養一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。 也可以在培養基中事先加入雙抗(*和氨芐*)。但雙抗有時會影響細胞的狀態,所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗,以避免影響實驗結果。1、孵箱應定期用三氧機消毒或者 紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內的水應是三蒸水2、超凈臺\取材\器材\培養液\培養瓶\操作等因素3、超凈臺的風機不能過大,風機到6-8格。否則也可能能致霉菌污染4、無菌室經甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的氨水噴灑中和,約幾小時即可進入操作。
嗜鹽菌選擇性瓊脂 250 用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(GB標準)
氯化鈉血瓊脂基礎 250 用于副溶血性弧菌的溶血試驗(GB標準)
霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA) 250 用于霍亂弧菌的生化試驗(SN標準)
T1N1 瓊脂 250 用于霍亂弧菌的培養(SN標準)
T1N0 肉湯 250 用于霍亂弧菌的生長試驗(SN標準)
T1N3 肉湯 250 用于霍亂弧菌的生長試驗(SN標準)
*葡萄糖斜面瓊脂 100 用于霍亂弧菌的復合生化試驗(SN標準)
*雙水解實驗用培養基(AD) 5g 生化培養基,用于弧菌的*試驗
mCPC培養基 250g 用于弧菌分離培養(FDA標準)
mCPC培養基添加劑 1ml*5 每瓶添加于100mlmCPC培養基中
副溶血性弧菌瓊脂 250g 用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養
副溶血性弧菌增菌液 250g 用于副溶血性弧菌的增菌培養
大腸桿菌顯色培養基 1000(ML) 用于快速、準確檢測大腸桿菌大腸桿菌培養24小時,顯蘭色
大腸菌群顯色培養基 1000(ML) 用于快速、準確檢測大腸菌群大腸菌群培養24小時,顯蘭色
大腸桿菌/大腸菌群顯色培養基 1000(ML) 用于快速、準確同時檢測大腸桿菌和大腸菌群,培養24小時,大腸桿菌顯紫色,大腸菌群顯紅色
大腸桿菌/大腸菌群顯色培養基 9CM平皿 用于快速、準確同時檢測大腸桿菌和大腸菌群,培養24小時,大腸桿菌顯紫色,大腸菌群顯紅色
TBX 培養基 1000(ML) 用于快速、準確檢測大腸菌群大腸菌群培養24小時,顯蘭色
細菌總數顯色培養基 250g 用于快速、準確檢測細菌總數,培養24小時,細菌顯紅色
O157顯色培養基 1000(ML) 用于O157菌的顯色培養
沙門氏菌顯色培養基 1000(ML) 用于沙門氏菌的顯色培養
李氏菌顯色培養基 1000(ML) 用于李氏菌的顯色培養
金黃色葡萄球顯色培養基 1000(ML) 用于*的顯色培養
霉菌和酵母菌顯色培養基 1000(ML) 用于霉菌和酵母菌的顯色培養
弧菌顯色培養基 1000(ML) 用于弧菌的顯色培養,副溶血性弧菌顯藍色,其它弧菌顯無色
坂崎桿菌顯色培養基 1000(ML) 用于坂崎桿菌的顯色培養基,坂崎桿菌顯藍色,其他腸桿菌顯無色
尿道定位顯色培養基 1000(ML) 用于分離和鑒別常見尿道致病菌
平板計數瓊脂培養基(含糖瓊脂PCA) BR 250g BR 250g
煌綠乳糖膽鹽肉湯培養基(BGLB) BR 250g BR 250g
結晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA) BR 250g BR 250g
緩沖蛋白胨水(BP)培養基 BR 250g BR 250g
李氏增菌液LB1配套試劑 2×5支 2×5支
HE瓊脂培養基 BR 250g BR 250g
木糖-賴氨酸-去氧膽酸鹽瓊脂(XLD) 250g 250g
胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂(TSA-YE) BR 250g BR 250g
胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯(TSB-YE)(EB增菌液基礎) BR 250g BR 250g
李氏菌增菌湯(LB1,LB2)基礎 BR 250g BR 250g
李氏增菌液LB1配套試劑 2×5支 2×5支
 

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