非小細胞肺腺癌細胞
細胞來源于美國ScienCell實驗室、美國ATCC細胞庫，所有細胞均為原代細胞，非細胞系。細胞經(jīng)過嚴格的控制（從組織來源、實驗室條件等方面），純度可達98％。不同的細胞傳代次數(shù)不一。多數(shù)細胞種類是從胚胎提取，于原代（或二代）凍存在液氮中。非小細胞肺腺癌細胞采用干冰運輸，客戶收到細胞后，從干冰中取出放入液氮中保存，待實驗安排好后，解凍后即可以進行復(fù)蘇培養(yǎng)。美國ATCC細胞庫、ScienCell實驗室的細胞、培養(yǎng)基都是經(jīng)過嚴格檢驗，分離、配制而成，產(chǎn)品質(zhì)量過硬。
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細胞培養(yǎng)常見問題
1.原代細胞與細胞系有什么區(qū)別？
細胞培養(yǎng)物來源于原代外植體或分散的細胞懸液。通常在這樣的培養(yǎng)物中細胞增殖形成匯合地單層細胞或密集地細胞懸液。根據(jù)傳統(tǒng)定義，*次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞[Freshney, R.I. （1987）. Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. （New York, Alan R. Liss, Inc.）]. 這類細胞生命周期有限，在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細胞zui大的生長空間，以保持細胞群中基因型和表型的*性。
細胞系是不斷生長，分化的細胞群，因其經(jīng)過遺傳改造，致使其具有無限增長的潛能。體外生長的細胞系用于醫(yī)療或科研。實際上，連續(xù)細胞系可以用大量次培養(yǎng)基培養(yǎng)，隨著代數(shù)的增加細胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。
需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
2.倍增和代數(shù)有什么區(qū)別？
倍增是培養(yǎng)物中細胞總數(shù)加倍，通常是指細胞指數(shù)或?qū)?shù)生*。代數(shù)是指細胞群從培養(yǎng)瓶中移出，傳代培養(yǎng)過程的次數(shù)，傳代培養(yǎng)的目的是使細胞處于低密度以刺激其進一步生長。
3.接收到的凍存細胞該如何處理？
收到包裝箱后，立即將凍存細胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快以避免升溫。不要將細胞儲存在-80℃，這樣會對細胞造成不可挽回的傷害。
4.有多少經(jīng)驗才能開始正常人類細胞培養(yǎng)？
*有經(jīng)驗者在無菌環(huán)境下用層流凈化罩工作，如果有經(jīng)驗的話對其它細胞類型也是很有利的。如果你是細胞培養(yǎng)的初學者或打算建立細胞培養(yǎng)實驗室，我們會為你提供幫助。請的細胞培養(yǎng)專家。
5.凍存的細胞該如何開始培養(yǎng)？
⑴將一管細胞從液氮罐中取出，注意保護手和眼睛。
⑵用10秒鐘時間將小管的蓋子擰松1/4以去除殘留在螺紋處的液氮，然后將蓋子蓋緊。
⑶將小管放入37℃水浴中，輕輕握住并旋轉(zhuǎn)，直到管內(nèi)物體*融化。
⑷將小管立即從水浴中拿出，擦干，轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境。
⑸用70％的酒精沖洗小管，然后擦去多余酒精。
⑹打開蓋子，注意手指不要碰到里面的螺紋。用1ml離心管離心內(nèi)容物。
⑺平衡管內(nèi)物，用多聚賴氨酸包被培養(yǎng)瓶（多數(shù)細胞用T-75的培養(yǎng)瓶）。多數(shù)細胞類型*接種密度為每平方厘米5000細胞。
⑻蓋好蓋子，輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細胞分布均勻。若需要氣體交換可打開蓋子。
⑼將培養(yǎng)瓶放放培養(yǎng)箱中（37℃,5%CO2,95%空氣）
⑽植入培養(yǎng)后第6-16小時更換一次培養(yǎng)基以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細胞。
6.當我*次植入正常人類細胞時需要旋轉(zhuǎn)細胞去除二甲基亞楓嗎？
*次植入正常凍存細胞時，我們不*旋轉(zhuǎn)去除二甲基亞楓。離心過程比殘留二甲基亞楓對細胞的傷害更大，尤其是不正當?shù)母咚傩D(zhuǎn)。我們的經(jīng)驗是如果二甲基亞楓的濃度很低，細胞不會受毒害。如果你將1ml細胞植入已加入15ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中，二甲基亞楓的濃度將小于0.67％，沒有發(fā)現(xiàn)負面影響。實際上，如果細胞的接種密度為每平方厘米5000-10000，二甲基亞楓的濃度很低。
7.多久更換一次培養(yǎng)基？
一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入凍存的細胞后，在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。
8.我能擴培和再冰凍的正常人類細胞嗎？
這取決于細胞類型。一些細胞類型像神經(jīng)細胞，神經(jīng)膠質(zhì)細胞和一些生長緩慢的上皮細胞不*擴培和再冰凍。其它的細胞類型像成纖維細胞、星形細胞、腎系膜細胞、星形膠質(zhì)細胞等等可以擴培和再冰凍。然而，需要注意的是再冰凍的過程可能導(dǎo)致細胞生長性能的改變。如果你想要再冰凍細胞，請親自咨詢我們的并使用SF-CFM，和特定的無血清培養(yǎng)基，以獲得的效果。
9.我能長時間凍存的培養(yǎng)基嗎？
不*凍存培養(yǎng)基，冰凍高營養(yǎng)的培養(yǎng)基將導(dǎo)致培養(yǎng)基成分不可逆降解。
10.培養(yǎng)瓶中應(yīng)該加入多少體積的培養(yǎng)基？
*用量：T-25培養(yǎng)瓶5ml,T-75培養(yǎng)瓶15ml,T-150培養(yǎng)瓶30ml。
11.使用你們的專業(yè)培養(yǎng)基，還需要另外的補充物嗎？
公司的培養(yǎng)基是為每一類細胞特定研制的。加入相關(guān)的培養(yǎng)成分（生長因子，抗生素和胎牛血清）到基本培養(yǎng)液中，你就得到了*培養(yǎng)基。其它的不再需要。
12.*培養(yǎng)基的保質(zhì)期是多久？
加入所有的補充物后，培養(yǎng)液就成了*培養(yǎng)基。如果*培養(yǎng)基儲存在4℃條件下，并且每次使用時置于常溫的時間盡量少，*培養(yǎng)基的保質(zhì)期為6周。
13.可以使用自己的或其它公司的培養(yǎng)基培養(yǎng)的正常人類細胞嗎？
公司的正常人類細胞使用我們的*培養(yǎng)基培養(yǎng)并通過測試，細胞已適應(yīng)此*培養(yǎng)基。使用其它的培養(yǎng)基，由于需要適應(yīng)過程可能會導(dǎo)致細胞不良生長。我們*使用我們特定的培養(yǎng)基培養(yǎng)正常人類細胞。
14.正常人類細胞能傳多少代？
不使用代數(shù)描述細胞的生長潛能，因為每一位客戶用不同的分流比。保證在培養(yǎng)過程中使用我們的培養(yǎng)基和試劑，正常人類細胞達到15倍增倍增（除了在說明書中已指明的）。
15.正常人類細胞*的分流比是多少？ 
公司不*對正常人類細胞使用分流比，因為在用*處理后細胞的產(chǎn)量會有所變化。我們*在*作用后對細胞計數(shù)，接種密度為5000-10000細胞每平方厘米（在細胞說明書中有*接種密度）。
16. 可以使正常人類細胞處于實驗性饑餓嗎？ 
可以將正常人類細胞處于實驗性饑餓。細胞在沒有添加物的基本培養(yǎng)基中可以維持一段時間，但細胞必須處于良好的環(huán)境中。過了這段時期，實驗應(yīng)終止，因為時間過長將導(dǎo)致細胞死亡。在實驗前測試一下細胞在饑餓條件下能存活多長時間，這取決于多種因素。
17. 可以用質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染正常人類細胞嗎？
當然，我們已成功轉(zhuǎn)染了多種細胞，比如皮膚成纖維細胞，肺成纖維細胞，皮膚微血管內(nèi)皮細胞等等。
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