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人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細胞株(HEK293)

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更新時間:2016-02-04 16:15:01瀏覽次數(shù):375次

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人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細胞株(HEK293)

人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細胞株(HEK293)
細胞來源于美國ScienCell實驗室、美國ATCC細胞庫,所有細胞均為原代細胞,非細胞系。細胞經(jīng)過嚴格的控制(從組織來源、實驗室條件等方面),純度可達98%。不同的細胞傳代次數(shù)不一。多數(shù)細胞種類是從胚胎提取,于原代(或二代)凍存在液氮中。人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細胞株(HEK293)采用干冰運輸,客戶收到細胞后,從干冰中取出放入液氮中保存,待實驗安排好后,解凍后即可以進行復(fù)蘇培養(yǎng)。美國ATCC細胞庫、ScienCell實驗室的細胞、培養(yǎng)基都是經(jīng)過嚴格檢驗,分離、配制而成,產(chǎn)品質(zhì)量過硬。
P選擇素(SELP)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CLIA Kit for Selectin, Plaet (SELP)Homo sapiens (Human)
 P選擇素(SELP)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CLIA Kit for Selectin, Plaet (SELP)Mus musculus (Mouse)
髓過氧化物酶(MPO)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CLIA Kit for Myeloperoxidase (MPO)Homo sapiens (Human) 
細胞培養(yǎng)常見問題
1.原代細胞與細胞系有什么區(qū)別?
細胞培養(yǎng)物來源于原代外植體或分散的細胞懸液。通常在這樣的培養(yǎng)物中細胞增殖形成匯合地單層細胞或密集地細胞懸液。根據(jù)傳統(tǒng)定義,*次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細胞生命周期有限,在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細胞zui大的生長空間,以保持細胞群中基因型和表型的*性。
細胞系是不斷生長,分化的細胞群,因其經(jīng)過遺傳改造,致使其具有無限增長的潛能。體外生長的細胞系用于醫(yī)療或科研。實際上,連續(xù)細胞系可以用大量次培養(yǎng)基培養(yǎng),隨著代數(shù)的增加細胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。
需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
2.倍增和代數(shù)有什么區(qū)別?
倍增是培養(yǎng)物中細胞總數(shù)加倍,通常是指細胞指數(shù)或?qū)?shù)生*。代數(shù)是指細胞群從培養(yǎng)瓶中移出,傳代培養(yǎng)過程的次數(shù),傳代培養(yǎng)的目的是使細胞處于低密度以刺激其進一步生長。
3.接收到的凍存細胞該如何處理?
收到包裝箱后,立即將凍存細胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快以避免升溫。不要將細胞儲存在-80℃,這樣會對細胞造成不可挽回的傷害。
4.有多少經(jīng)驗才能開始正常人類細胞培養(yǎng)?
*有經(jīng)驗者在無菌環(huán)境下用層流凈化罩工作,如果有經(jīng)驗的話對其它細胞類型也是很有利的。如果你是細胞培養(yǎng)的初學(xué)者或打算建立細胞培養(yǎng)實驗室,我們會為你提供幫助。請的細胞培養(yǎng)專家。
5.凍存的細胞該如何開始培養(yǎng)?
⑴將一管細胞從液氮罐中取出,注意保護手和眼睛。
⑵用10秒鐘時間將小管的蓋子擰松1/4以去除殘留在螺紋處的液氮,然后將蓋子蓋緊。
⑶將小管放入37℃水浴中,輕輕握住并旋轉(zhuǎn),直到管內(nèi)物體*融化。
⑷將小管立即從水浴中拿出,擦干,轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境。
⑸用70%的酒精沖洗小管,然后擦去多余酒精。
⑹打開蓋子,注意手指不要碰到里面的螺紋。用1ml離心管離心內(nèi)容物。
⑺平衡管內(nèi)物,用多聚賴氨酸包被培養(yǎng)瓶(多數(shù)細胞用T-75的培養(yǎng)瓶)。多數(shù)細胞類型*接種密度為每平方厘米5000細胞。
⑻蓋好蓋子,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細胞分布均勻。若需要氣體交換可打開蓋子。
⑼將培養(yǎng)瓶放放培養(yǎng)箱中(37℃,5%CO2,95%空氣)
⑽植入培養(yǎng)后第6-16小時更換一次培養(yǎng)基以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細胞。
6.當(dāng)我*次植入正常人類細胞時需要旋轉(zhuǎn)細胞去除二甲基亞楓嗎?
*次植入正常凍存細胞時,我們不*旋轉(zhuǎn)去除二甲基亞楓。離心過程比殘留二甲基亞楓對細胞的傷害更大,尤其是不正當(dāng)?shù)母咚傩D(zhuǎn)。我們的經(jīng)驗是如果二甲基亞楓的濃度很低,細胞不會受毒害。如果你將1ml細胞植入已加入15ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中,二甲基亞楓的濃度將小于0.67%,沒有發(fā)現(xiàn)負面影響。實際上,如果細胞的接種密度為每平方厘米5000-10000,二甲基亞楓的濃度很低。
7.多久更換一次培養(yǎng)基?
一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入凍存的細胞后,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。
8.我能擴培和再冰凍的正常人類細胞嗎?
這取決于細胞類型。一些細胞類型像神經(jīng)細胞,神經(jīng)膠質(zhì)細胞和一些生長緩慢的上皮細胞不*擴培和再冰凍。其它的細胞類型像成纖維細胞、星形細胞、腎系膜細胞、星形膠質(zhì)細胞等等可以擴培和再冰凍。然而,需要注意的是再冰凍的過程可能導(dǎo)致細胞生長性能的改變。如果你想要再冰凍細胞,請親自咨詢我們的并使用SF-CFM,和特定的無血清培養(yǎng)基,以獲得的效果。
9.我能長時間凍存的培養(yǎng)基嗎?
不*凍存培養(yǎng)基,冰凍高營養(yǎng)的培養(yǎng)基將導(dǎo)致培養(yǎng)基成分不可逆降解。
10.培養(yǎng)瓶中應(yīng)該加入多少體積的培養(yǎng)基?
*用量:T-25培養(yǎng)瓶5ml,T-75培養(yǎng)瓶15ml,T-150培養(yǎng)瓶30ml。
11.使用你們的專業(yè)培養(yǎng)基,還需要另外的補充物嗎?
公司的培養(yǎng)基是為每一類細胞特定研制的。加入相關(guān)的培養(yǎng)成分(生長因子,抗生素和胎牛血清)到基本培養(yǎng)液中,你就得到了*培養(yǎng)基。其它的不再需要。
12.*培養(yǎng)基的保質(zhì)期是多久?
加入所有的補充物后,培養(yǎng)液就成了*培養(yǎng)基。如果*培養(yǎng)基儲存在4℃條件下,并且每次使用時置于常溫的時間盡量少,*培養(yǎng)基的保質(zhì)期為6周。
13.可以使用自己的或其它公司的培養(yǎng)基培養(yǎng)的正常人類細胞嗎?
公司的正常人類細胞使用我們的*培養(yǎng)基培養(yǎng)并通過測試,細胞已適應(yīng)此*培養(yǎng)基。使用其它的培養(yǎng)基,由于需要適應(yīng)過程可能會導(dǎo)致細胞不良生長。我們*使用我們特定的培養(yǎng)基培養(yǎng)正常人類細胞。
14.正常人類細胞能傳多少代?
不使用代數(shù)描述細胞的生長潛能,因為每一位客戶用不同的分流比。保證在培養(yǎng)過程中使用我們的培養(yǎng)基和試劑,正常人類細胞達到15倍增倍增(除了在說明書中已指明的)。
15.正常人類細胞*的分流比是多少? 
公司不*對正常人類細胞使用分流比,因為在用*處理后細胞的產(chǎn)量會有所變化。我們*在*作用后對細胞計數(shù),接種密度為5000-10000細胞每平方厘米(在細胞說明書中有*接種密度)。
16. 可以使正常人類細胞處于實驗性饑餓嗎? 
可以將正常人類細胞處于實驗性饑餓。細胞在沒有添加物的基本培養(yǎng)基中可以維持一段時間,但細胞必須處于良好的環(huán)境中。過了這段時期,實驗應(yīng)終止,因為時間過長將導(dǎo)致細胞死亡。在實驗前測試一下細胞在饑餓條件下能存活多長時間,這取決于多種因素。
17. 可以用質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染正常人類細胞嗎?
當(dāng)然,我們已成功轉(zhuǎn)染了多種細胞,比如皮膚成纖維細胞,肺成纖維細胞,皮膚微血管內(nèi)皮細胞等等。
基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)Mus musculus (Mouse)
表皮生長因子(EGF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CLIA Kit for Epidermal Growth Factor (EGF)Homo sapiens (Human)
表皮生長因子(EGF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CLIA Kit for Epidermal Growth Factor (EGF)Mus musculus (Mouse)
表皮生長因子(EGF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CLIA Kit for Epidermal Growth Factor (EGF)Rattus norvegicus (Rat)
白介素1β(IL1β)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CLIA Kit for Interleukin 1 Beta (IL1b)Homo sapiens (Human)
白介素1β(IL1β)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CLIA Kit for Interleukin 1 Beta (IL1b)Mus musculus (Mouse)
白介素1β(IL1β)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CLIA Kit for Interleukin 1 Beta (IL1b)Rattus norvegicus (Rat)
 

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