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小鼠腎系膜細(xì)胞

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小鼠腎系膜細(xì)胞

小鼠腎系膜細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源于美國(guó)ScienCell實(shí)驗(yàn)室、美國(guó)ATCC細(xì)胞庫(kù),所有細(xì)胞均為原代細(xì)胞,非細(xì)胞系。細(xì)胞經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的控制(從組織來(lái)源、實(shí)驗(yàn)室條件等方面),純度可達(dá)98%。不同的細(xì)胞傳代次數(shù)不一。多數(shù)細(xì)胞種類(lèi)是從胚胎提取,于原代(或二代)凍存在液氮中。小鼠腎系膜細(xì)胞采用干冰運(yùn)輸,客戶收到細(xì)胞后,從干冰中取出放入液氮中保存,待實(shí)驗(yàn)安排好后,解凍后即可以進(jìn)行復(fù)蘇培養(yǎng)。美國(guó)ATCC細(xì)胞庫(kù)、ScienCell實(shí)驗(yàn)室的細(xì)胞、培養(yǎng)基都是經(jīng)過(guò)嚴(yán)格檢驗(yàn),分離、配制而成,產(chǎn)品質(zhì)量過(guò)硬。
Rat tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA Kit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA KiISA. 96T
 Rat basic fibroblast growth factor,bFGF ELISA Kit 大鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)ELISA KiISA. 96T
Rat macrophage inflammatory protein 5,MIP-5 ELISA Kit大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白5(MIP-5)ELISA Kit ELISA. 96T 
細(xì)胞培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題
1.原代細(xì)胞與細(xì)胞系有什么區(qū)別?
細(xì)胞培養(yǎng)物來(lái)源于原代外植體或分散的細(xì)胞懸液。通常在這樣的培養(yǎng)物中細(xì)胞增殖形成匯合地單層細(xì)胞或密集地細(xì)胞懸液。根據(jù)傳統(tǒng)定義,*次收獲和接種的細(xì)胞被稱(chēng)為原代細(xì)胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類(lèi)細(xì)胞生命周期有限,在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細(xì)胞zui大的生長(zhǎng)空間,以保持細(xì)胞群中基因型和表型的*性。
細(xì)胞系是不斷生長(zhǎng),分化的細(xì)胞群,因其經(jīng)過(guò)遺傳改造,致使其具有無(wú)限增長(zhǎng)的潛能。體外生長(zhǎng)的細(xì)胞系用于醫(yī)療或科研。實(shí)際上,連續(xù)細(xì)胞系可以用大量次培養(yǎng)基培養(yǎng),隨著代數(shù)的增加細(xì)胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。
需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
2.倍增和代數(shù)有什么區(qū)別?
倍增是培養(yǎng)物中細(xì)胞總數(shù)加倍,通常是指細(xì)胞指數(shù)或?qū)?shù)生*。代數(shù)是指細(xì)胞群從培養(yǎng)瓶中移出,傳代培養(yǎng)過(guò)程的次數(shù),傳代培養(yǎng)的目的是使細(xì)胞處于低密度以刺激其進(jìn)一步生長(zhǎng)。
3.接收到的凍存細(xì)胞該如何處理?
收到包裝箱后,立即將凍存細(xì)胞從干冰移入液氮中凍存。此過(guò)程盡量快以避免升溫。不要將細(xì)胞儲(chǔ)存在-80℃,這樣會(huì)對(duì)細(xì)胞造成不可挽回的傷害。
4.有多少經(jīng)驗(yàn)才能開(kāi)始正常人類(lèi)細(xì)胞培養(yǎng)?
*有經(jīng)驗(yàn)者在無(wú)菌環(huán)境下用層流凈化罩工作,如果有經(jīng)驗(yàn)的話對(duì)其它細(xì)胞類(lèi)型也是很有利的。如果你是細(xì)胞培養(yǎng)的初學(xué)者或打算建立細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室,我們會(huì)為你提供幫助。請(qǐng)的細(xì)胞培養(yǎng)專(zhuān)家。
5.凍存的細(xì)胞該如何開(kāi)始培養(yǎng)?
⑴將一管細(xì)胞從液氮罐中取出,注意保護(hù)手和眼睛。
⑵用10秒鐘時(shí)間將小管的蓋子擰松1/4以去除殘留在螺紋處的液氮,然后將蓋子蓋緊。
⑶將小管放入37℃水浴中,輕輕握住并旋轉(zhuǎn),直到管內(nèi)物體*融化。
⑷將小管立即從水浴中拿出,擦干,轉(zhuǎn)入無(wú)菌環(huán)境。
⑸用70%的酒精沖洗小管,然后擦去多余酒精。
⑹打開(kāi)蓋子,注意手指不要碰到里面的螺紋。用1ml離心管離心內(nèi)容物。
⑺平衡管內(nèi)物,用多聚賴氨酸包被培養(yǎng)瓶(多數(shù)細(xì)胞用T-75的培養(yǎng)瓶)。多數(shù)細(xì)胞類(lèi)型*接種密度為每平方厘米5000細(xì)胞。
⑻蓋好蓋子,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻。若需要?dú)怏w交換可打開(kāi)蓋子。
⑼將培養(yǎng)瓶放放培養(yǎng)箱中(37℃,5%CO2,95%空氣)
⑽植入培養(yǎng)后第6-16小時(shí)更換一次培養(yǎng)基以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細(xì)胞。
6.當(dāng)我*次植入正常人類(lèi)細(xì)胞時(shí)需要旋轉(zhuǎn)細(xì)胞去除二甲基亞楓嗎?
*次植入正常凍存細(xì)胞時(shí),我們不*旋轉(zhuǎn)去除二甲基亞楓。離心過(guò)程比殘留二甲基亞楓對(duì)細(xì)胞的傷害更大,尤其是不正當(dāng)?shù)母咚傩D(zhuǎn)。我們的經(jīng)驗(yàn)是如果二甲基亞楓的濃度很低,細(xì)胞不會(huì)受毒害。如果你將1ml細(xì)胞植入已加入15ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中,二甲基亞楓的濃度將小于0.67%,沒(méi)有發(fā)現(xiàn)負(fù)面影響。實(shí)際上,如果細(xì)胞的接種密度為每平方厘米5000-10000,二甲基亞楓的濃度很低。
7.多久更換一次培養(yǎng)基?
一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入凍存的細(xì)胞后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。
8.我能擴(kuò)培和再冰凍的正常人類(lèi)細(xì)胞嗎?
這取決于細(xì)胞類(lèi)型。一些細(xì)胞類(lèi)型像神經(jīng)細(xì)胞,神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和一些生長(zhǎng)緩慢的上皮細(xì)胞不*擴(kuò)培和再冰凍。其它的細(xì)胞類(lèi)型像成纖維細(xì)胞、星形細(xì)胞、腎系膜細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞等等可以擴(kuò)培和再冰凍。然而,需要注意的是再冰凍的過(guò)程可能導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)性能的改變。如果你想要再冰凍細(xì)胞,請(qǐng)親自咨詢我們的并使用SF-CFM,和特定的無(wú)血清培養(yǎng)基,以獲得的效果。
9.我能長(zhǎng)時(shí)間凍存的培養(yǎng)基嗎?
不*凍存培養(yǎng)基,冰凍高營(yíng)養(yǎng)的培養(yǎng)基將導(dǎo)致培養(yǎng)基成分不可逆降解。
10.培養(yǎng)瓶中應(yīng)該加入多少體積的培養(yǎng)基?
*用量:T-25培養(yǎng)瓶5ml,T-75培養(yǎng)瓶15ml,T-150培養(yǎng)瓶30ml。
11.使用你們的專(zhuān)業(yè)培養(yǎng)基,還需要另外的補(bǔ)充物嗎?
公司的培養(yǎng)基是為每一類(lèi)細(xì)胞特定研制的。加入相關(guān)的培養(yǎng)成分(生長(zhǎng)因子,抗生素和胎牛血清)到基本培養(yǎng)液中,你就得到了*培養(yǎng)基。其它的不再需要。
12.*培養(yǎng)基的保質(zhì)期是多久?
加入所有的補(bǔ)充物后,培養(yǎng)液就成了*培養(yǎng)基。如果*培養(yǎng)基儲(chǔ)存在4℃條件下,并且每次使用時(shí)置于常溫的時(shí)間盡量少,*培養(yǎng)基的保質(zhì)期為6周。
13.可以使用自己的或其它公司的培養(yǎng)基培養(yǎng)的正常人類(lèi)細(xì)胞嗎?
公司的正常人類(lèi)細(xì)胞使用我們的*培養(yǎng)基培養(yǎng)并通過(guò)測(cè)試,細(xì)胞已適應(yīng)此*培養(yǎng)基。使用其它的培養(yǎng)基,由于需要適應(yīng)過(guò)程可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞不良生長(zhǎng)。我們*使用我們特定的培養(yǎng)基培養(yǎng)正常人類(lèi)細(xì)胞。
14.正常人類(lèi)細(xì)胞能傳多少代?
不使用代數(shù)描述細(xì)胞的生長(zhǎng)潛能,因?yàn)槊恳晃豢蛻粲貌煌姆至鞅取1WC在培養(yǎng)過(guò)程中使用我們的培養(yǎng)基和試劑,正常人類(lèi)細(xì)胞達(dá)到15倍增倍增(除了在說(shuō)明書(shū)中已指明的)。
15.正常人類(lèi)細(xì)胞*的分流比是多少? 
公司不*對(duì)正常人類(lèi)細(xì)胞使用分流比,因?yàn)樵谟?處理后細(xì)胞的產(chǎn)量會(huì)有所變化。我們*在*作用后對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù),接種密度為5000-10000細(xì)胞每平方厘米(在細(xì)胞說(shuō)明書(shū)中有*接種密度)。
16. 可以使正常人類(lèi)細(xì)胞處于實(shí)驗(yàn)性饑餓嗎? 
可以將正常人類(lèi)細(xì)胞處于實(shí)驗(yàn)性饑餓。細(xì)胞在沒(méi)有添加物的基本培養(yǎng)基中可以維持一段時(shí)間,但細(xì)胞必須處于良好的環(huán)境中。過(guò)了這段時(shí)期,實(shí)驗(yàn)應(yīng)終止,因?yàn)闀r(shí)間過(guò)長(zhǎng)將導(dǎo)致細(xì)胞死亡。在實(shí)驗(yàn)前測(cè)試一下細(xì)胞在饑餓條件下能存活多長(zhǎng)時(shí)間,這取決于多種因素。
17. 可以用質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染正常人類(lèi)細(xì)胞嗎?
當(dāng)然,我們已成功轉(zhuǎn)染了多種細(xì)胞,比如皮膚成纖維細(xì)胞,肺成纖維細(xì)胞,皮膚微血管內(nèi)皮細(xì)胞等等。
Rat leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA Kit 大鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA KiISA. 96T
Rat Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit 大鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA KiISA. 96T
Rat intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA Kit大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA KiISA. 96T
Rat omerase,TE ELISA Kit 大鼠端粒酶(TE)ELISA KiISA. 96T
Rat matrix metalloproteinase 5,MMP-5 ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA KiISA. 96T
Rat matrix metalloproteinase 4,MMP-4 ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA KiISA. 96T
Rat matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA KiISA. 96T
 

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