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HEL細(xì)胞,*系

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2017-02-01 08:19:11瀏覽次數(shù):309次

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產(chǎn)品名稱:HEL細(xì)胞,*系 

產(chǎn)品用途:科研
保證運(yùn)輸中細(xì)胞的正常生長(zhǎng),關(guān)于其價(jià)格、報(bào)價(jià)、貨期,請(qǐng)咨詢我們。
產(chǎn)品特點(diǎn):活性好、存活率高、實(shí)驗(yàn)成果特征明顯
產(chǎn)品來源:人組織、小鼠組織、大鼠組織、兔組織等動(dòng)物組織
產(chǎn)品運(yùn)輸:免費(fèi)快遞
產(chǎn)品包裝:瓶裝
產(chǎn)品用途:細(xì)胞培養(yǎng)研究
下面是有關(guān)細(xì)胞株,菌株培養(yǎng)的具體無(wú)菌技術(shù):
1. 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,無(wú)菌室及無(wú)菌操作臺(tái)(laminar flow) 以紫外燈照射30-60 分鐘滅菌,以70 % ethanol 擦拭無(wú)菌操作臺(tái)面,并開啟無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10 分鐘后,才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái),以70 % ethanol 擦拭無(wú)菌操作臺(tái)面。操作間隔應(yīng)讓無(wú)菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后,再進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株的操作。
2. 無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管、吸取器或吸管盒等可以暫時(shí)放置,其它實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出,以利于氣流之流通。實(shí)驗(yàn)用品以70 % ethanol 擦拭后才帶入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在臺(tái)面的*無(wú)菌區(qū)域,勿在邊緣的非無(wú)菌區(qū)域操作。
3. 小心取用無(wú)菌的實(shí)驗(yàn)物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或容器瓶口,亦不要在打開的容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45° 角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
4. 工作人員應(yīng)注意自身的安全,須穿戴實(shí)驗(yàn)衣及手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對(duì)于來自人類或是病毒感染的細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作,并選擇適當(dāng)?shù)燃?jí)的無(wú)菌操作臺(tái)(至少Class II)。操作過程中,應(yīng)避免引起aerosol 的產(chǎn)生,小心毒性藥品,例如DMSO 及TPA 等,并避免尖銳針頭的傷害等。
5. 定期檢測(cè)下列項(xiàng)目:
5.1. CO2 鋼瓶的CO2 壓力
5.2. CO2 培養(yǎng)箱的CO2 濃度、溫度、及水盤是否有污染(水盤的水用無(wú)菌水,每周更換)。
5.3. 無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)的airflow 壓力,定期更換紫外線燈管及HEPA 過濾膜,預(yù)濾網(wǎng)(300小時(shí)/預(yù)濾網(wǎng),3000 小時(shí)/HEPA)。
6. 水槽可添加消毒劑(Zephrin 1:750),定期更換水槽的水。

HEL細(xì)胞,*系傳代方法:細(xì)胞*匯合時(shí),倒掉舊液,加入消化液(0.25%*+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)細(xì)胞后棄掉*,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。
郵購(gòu)備注: 收到細(xì)胞后,請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若有懸浮的細(xì)胞,請(qǐng)離心收集細(xì)胞,接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進(jìn)口胎牛血清,剛接到細(xì)胞時(shí)血清濃度可以在15%。本產(chǎn)品經(jīng)過了細(xì)菌、真菌、霉菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原體檢測(cè)。
我們將為客服提供全面的細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞染色、(MTT)比色法、細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞污染、常規(guī)生物材料細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)等等細(xì)胞實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)。
細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對(duì)細(xì)胞造成損害。
具體操作 (一)實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備: 1.將水浴鍋預(yù)熱至37℃ 2.用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。 3.在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等等。
(二)取出凍存管: 1.根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號(hào)。 2.從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時(shí)核對(duì)管外的編號(hào)。
(三)迅速解凍: 1.迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動(dòng),使管中的液體迅速融化。 2.約1-2min后凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺(tái)內(nèi)。
(四)平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min。
(五)制備細(xì)胞懸液: 1.吸棄上清液。 2.向離心管內(nèi)加入10ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。 (六)細(xì)胞計(jì)數(shù): 細(xì)胞濃度以5×105/ml為宜。
(七)培養(yǎng)細(xì)胞 將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(shí)(或者24-48小時(shí))后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。
初學(xué)者易犯錯(cuò)誤: 1.水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。 2.水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時(shí)間延長(zhǎng)。 3.離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。 4.一次復(fù)蘇細(xì)胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
HEL細(xì)胞,*系有庫(kù)存,公司其他細(xì)胞產(chǎn)品:

人胃癌細(xì)胞 BGC-803
人胃癌細(xì)胞 MGC-803
人食管癌細(xì)胞 CaEs-17
人乳腺癌細(xì)胞 ZR75-1
人乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 MDA-MB-435
人乳腺癌細(xì)胞 LCC1
人乳腺癌細(xì)胞 MX-1
人卵巢癌細(xì)胞 A2780
人卵巢癌細(xì)胞 OVCaR-3
人卵巢癌細(xì)胞 COC1
人宮頸癌細(xì)胞 SiHa
人前列腺癌細(xì)胞 PC-3M
人結(jié)腸癌細(xì)胞 HT-29
人結(jié)腸癌細(xì)胞 SW620
人結(jié)腸癌細(xì)胞 SW480
人結(jié)腸癌細(xì)胞 COLO205
人大腸癌細(xì)胞 CL187/CCL187
人大腸癌細(xì)胞 PA319
人胰腺癌細(xì)胞 AsPc
人肝癌細(xì)胞 HepG-2

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