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NIH/3T3細(xì)胞,NIH/3T3細(xì)胞

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更新時(shí)間:2016-11-07 22:42:53瀏覽次數(shù):272次

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產(chǎn)品名稱:NIH/3T3細(xì)胞,NIH/3T3細(xì)胞
產(chǎn)品用途:科研
保證運(yùn)輸中細(xì)胞的正常生長,關(guān)于其價(jià)格、報(bào)價(jià)、貨期,請(qǐng)咨詢我們。
產(chǎn)品特點(diǎn):活性好、存活率高、實(shí)驗(yàn)成果特征明顯
產(chǎn)品來源:人組織、小鼠組織、大鼠組織、兔組織等動(dòng)物組織
產(chǎn)品運(yùn)輸:免費(fèi)快遞
產(chǎn)品包裝:瓶裝
產(chǎn)品用途:細(xì)胞培養(yǎng)研究
細(xì)胞周期的DNA檢測(cè)
  Ⅰ、樣品準(zhǔn)備 準(zhǔn)備以下一種或幾種樣品
  A、組織單細(xì)胞懸浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盤細(xì)胞)
        B、組織培養(yǎng)細(xì)胞
  C、Ficoll-hypaque分離的單核細(xì)胞
  Ⅱ、反應(yīng)體系-DNA低滲緩沖液
  檸檬酸三鈉 0.25g
  Triton-X 100 0.75ml
  Propidium iodide 0.025g
  核糖核酸酶 0.005g
  蒸餾水 250ml
  我們將該DNA低滲溶液于密閉瓶子中存放數(shù)月后并無發(fā)現(xiàn)有任何染色活性的丟失
  Ⅲ、染色
  1、 每一個(gè)管子中放入1×106個(gè)細(xì)胞;
  2、 樣品離心后盡可能*地移去上清液,并且不要打碎沉淀塊;    3、 入1ml的DNA低滲染色(可用甲基綠進(jìn)行染色)緩沖液至沉淀中,并混勻;
  4、 樣品于4℃下避光30分鐘或zui長不超過1個(gè)小時(shí)以備流式細(xì)胞儀分析 。  
 注意:延長在低滲緩沖液的曝光時(shí)間會(huì)引起樣品碎片的增加
NIH/3T3細(xì)胞,NIH/3T3細(xì)胞傳代方法:細(xì)胞*匯合時(shí),倒掉舊液,加入消化液(0.25%*+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)細(xì)胞后棄掉*,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。
郵購備注: 收到細(xì)胞后,請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若有懸浮的細(xì)胞,請(qǐng)離心收集細(xì)胞,接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進(jìn)口胎牛血清,剛接到細(xì)胞時(shí)血清濃度可以在15%。本產(chǎn)品經(jīng)過了細(xì)菌、真菌、霉菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原體檢測(cè)。
我們將為客服提供全面的細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞染色、(MTT)比色法、細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞污染、常規(guī)生物材料細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)等等細(xì)胞實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)。
細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對(duì)細(xì)胞造成損害。
具體操作 (一)實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備: 1.將水浴鍋預(yù)熱至37℃ 2.用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。 3.在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等等。
(二)取出凍存管: 1.根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號(hào)。 2.從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時(shí)核對(duì)管外的編號(hào)。
(三)迅速解凍: 1.迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動(dòng),使管中的液體迅速融化。 2.約1-2min后凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺(tái)內(nèi)。
(四)平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min。
(五)制備細(xì)胞懸液: 1.吸棄上清液。 2.向離心管內(nèi)加入10ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。 (六)細(xì)胞計(jì)數(shù): 細(xì)胞濃度以5×105/ml為宜。
(七)培養(yǎng)細(xì)胞 將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(shí)(或者24-48小時(shí))后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。
初學(xué)者易犯錯(cuò)誤: 1.水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。 2.水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時(shí)間延長。 3.離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。 4.一次復(fù)蘇細(xì)胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
NIH/3T3細(xì)胞,NIH/3T3細(xì)胞有庫存,公司其他細(xì)胞產(chǎn)品:

C6/36 蚊子細(xì)胞
PA317 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝的NIH3T3細(xì)胞
AN3 CA 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞
H4 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞
HEC-1-B 人子宮膜腺癌細(xì)胞
MADB106 大鼠乳腺腺癌細(xì)胞系
801-D 人巨細(xì)胞性肺癌細(xì)胞
A2 人腺樣囊性癌細(xì)胞
95-D 人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞
AM 人腺樣囊性癌細(xì)胞(高轉(zhuǎn)移)
Acc- 2 人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞
A cc-3 人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞
H125 人肺癌細(xì)胞
Hep-2 人喉表皮癌細(xì)胞
KB 人口腔上皮癌細(xì)胞
QG-56 人肺扁平上皮癌細(xì)胞
Tca-8113 人舌鱗癌細(xì)胞
TE-1 人舌鱗癌細(xì)胞
LTEP-Sm1 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞(SCLC)
NCI-H446 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
NCI-H661 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞
NCI-H292 人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)
NCI-H460 人肺癌細(xì)胞
SPC-A-1 人肺腺癌細(xì)胞

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