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背景介紹:Microtubule-actin crosslinking factor 1 (MACF1/ACF7) belongs to spectraplakin family of proteins which also includes mammalian Bpag1/dystonin, Drosophila Short Stop (Shot) and Caenorhabditis elegans Vab-10. These are large actin-microtubule linker molecules that are essential for various biological processes such as neuronal degeneration, wound healing, gastrulation. MACF1, located on mouse chromosome 4D2.2, was found to play an important role during neurogenesis- it was shown that MACF1 regulates the organization of neuronal microtubules which is essential for axon extension. Furthermore, MACF1 is required in controlling focal adhesion assembly and dynamics. MACF1 behaves as an actin-regulated ATPase and it has the ability to target microtubules that track along F-actin to focal adhesions. MACF1 was also implicated in regulating filopodia formation.
別名:ABP620; Acf7; Aclp7; Actin cross linking family 7; MACF; Microtubule actin crosslinking factor 1; mKIAA0465; R74989; rabeculin alpha.
肌動蛋白交聯蛋白家族7抗體,Anti-MACF1抗體簡單介紹:
產品編號:BYK-18545R
英文名稱:Anti-MACF1/ACF7
中文名稱:肌動蛋白交聯蛋白家族7抗體
產品規格:50ul;100ul;200ul;1ml,*
抗體來源 Rabbit or Mouse
克隆類型 Polyclonal or Monoclonal
交叉反應、產品應用 (具體交叉反應與產品應用請或添加客服直接索取)
性 狀 Lyophilized or Liquid
濃 度 1mg/ml
肌動蛋白交聯蛋白家族7抗體,Anti-MACF1抗體產品信息:
Western Blotting 具體實驗步驟
Western,也稱Western blot、Western blotting、Western 印跡,是用抗體檢測蛋白的重要方法之一。
Western可以參考如下步驟進行操作:
2、電泳(Electrophoresis)
(1)、SDS-PAGE凝膠配制
SDS-PAGE凝膠可以參考一些文獻資料進行配制,也可以使用上海博研生物的SDS-PAGE凝膠配制試劑盒。該試劑盒提供了除水和配膠器具外的所有試劑以及配制各種濃度SDS-PAGE的配方。
(2)、樣品處理
在收集的蛋白樣品中加入適量濃縮的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液。例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液。使用5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液可以減小上樣體積,在相同體積的上樣孔內可以上樣更多的蛋白樣品。5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液可以參考相關文獻資料配制,也可以使用上海博研生物的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X) 。100℃或沸水浴加熱3-5分鐘,以充分變性蛋白。
(3)、上樣與電泳
冷卻到室溫后,把蛋白樣品直接上樣到SDS-PAGE膠加樣孔內即可。為了便于觀察電泳效果和轉膜效果,以及判斷蛋白分子量大小,使用預染蛋白質分子量標準。
電泳時通常*在上層膠時使用低電壓恒壓電泳,而在溴酚藍進入下層膠時使用高電壓恒壓電泳。對于Bio-Rad的標準電泳裝置或類似電泳裝置,低電壓可以設置在80-100V,高電壓可以設置在120V左右。SDS-PAGE可以采用普通的電泳儀就可以滿足要求。為了電泳方便起見,也可以采用整個SDS-PAGE過程恒壓的方式,通常把電壓設置在100V,然后設定定時時間為90-120分鐘。設置定時可以避免經常發生的電泳過頭。
通常電泳時溴酚藍到達膠的底端處附近即可停止電泳,或者可以根據預染蛋白質分子量標準的電泳情況,預計目的蛋白已經被適當分離后即可停止電泳。
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