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大鼠一氧化氮合成酶試劑盒,大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒

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本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍:                                                          96T
1μmol/L - 32μmol/L
 
使用目的:
本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中一氧化氮合成酶(NOS)含量。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠一氧化氮合成酶(NOS)水平。用純化的大鼠一氧化氮合成酶(NOS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入一氧化氮合成酶(NOS),再與HRP標(biāo)記的一氧化氮合成酶(NOS)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的一氧化氮合成酶(NOS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠一氧化氮合成酶(NOS)濃度。
大鼠一氧化氮合成酶試劑盒,大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒試劑盒組成

1
30倍濃縮洗滌液
20ml×1瓶
7
終止液
6ml×1瓶
2
酶標(biāo)試劑
6ml×1瓶
8
標(biāo)準(zhǔn)品(64μmol/L)
0.5ml×1瓶
3
酶標(biāo)包被板
12孔×8條
9
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5ml×1瓶
4
樣品稀釋液
6ml×1瓶
10
說明書
1份
5
顯色劑A液
6ml×1瓶
11
封板膜
2張 
6
顯色劑B液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1個

標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1.         標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

32μmol/L
5號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
16μmol/L
4號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
8μmol/L
3號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
4μmol/L
2號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2μmol/L
1號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2.         加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
4.         配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.         加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.         溫育:操作同3。
8.         洗滌:操作同5。
9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.     測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
 
大鼠一氧化氮合成酶試劑盒,大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒計算
  以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
大鼠一氧化氮合成酶試劑盒,大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月

大鼠一氧化氮合成酶試劑盒,大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒部分推薦產(chǎn)品:

Anti-BRAF/FITC  熒光素標(biāo)記黑素瘤相關(guān)蛋白抗體IgG
Anti-BRCA1(human)/FITC  熒光素標(biāo)記乳腺癌易感基因1抗體(人)IgG
Anti-BRCA1(mouse rat)/FITC  熒光素標(biāo)記乳腺癌易感基因1抗體(小鼠 大鼠)IgG
Anti-BRCA2/FITC  熒光素標(biāo)記乳腺癌易感基因2抗體IgG
Anti-BrdU/FITC(Bromodeoxyuridine)  熒光素標(biāo)記兔抗溴脫氧尿苷抗體IgG
Anti-BrdU/FITC  熒光素標(biāo)記溴脫氧
尿苷抗體IgG
Anti-Brg1/FITC  熒光素標(biāo)記新的抑癌基因Brg1抗體IgG
Anti-BRMS-1/FITC  熒光素標(biāo)記乳腺癌轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體IgG
Anti-BTG2/TIS21/FITC  熒光素標(biāo)記B細(xì)胞遷移基因2抗體IgG
Anti-Brucella/FITC  熒光素標(biāo)記抗布魯氏菌抗體IgG
Anti-Brucella/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記抗布魯氏菌抗體IgG
Anti-Brucella/Biotin  *標(biāo)記抗布魯氏菌抗體IgG
Anti-BSEP/FITC  熒光素標(biāo)記膽汁酸鹽輸出泵蛋白抗體IgG
Anti-BSP/FITC  熒光素標(biāo)記骨涎蛋白抗體IgG
Anti-C/FITC  熒光素標(biāo)記過敏毒素C(補體C)抗體IgG
Anti-CA125/FITC  熒光素標(biāo)記卵巢癌抗原抗體IgG

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