本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子受體β1（TGF-β1）水平。用純化的大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子受體β1（TGF-β1）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子受體β1（TGF-β1），再與HRP標(biāo)記的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子受體β1（TGF-β1）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子受體β1（TGF-β1）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子受體β1（TGF-β1）濃度。

大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子受體β1（TGF-β1）ELISA試劑盒*

標(biāo)本要求

1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支，用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

800 pg/ml	5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
400 pg/ml	4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
200 pg/ml	3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
100 pg/ml	2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
50 pg/ml	1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。

大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子受體β1（TGF-β1）ELISA試劑盒*相關(guān)產(chǎn)品：

人蛋白磷酸酶（PP）ELISA試劑盒 96T48T
人硫氧還蛋白還原酶（TrxR）ELISA試劑盒 96T48T
人硫氧化還原蛋白（Trx）ELISA試劑盒 96T48T
人成骨生長(zhǎng)肽（OGP）ELISA試劑盒 96T48T
人白細(xì)胞彈性蛋白酶（HLE）ELISA試劑盒 96T48T
人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素（MBP/MBL）ELISA試劑盒 96T48T
人基質(zhì)γ羧基*蛋白（MGP）ELISA試劑盒 96T48T
人基質(zhì)裂解蛋白（MAT）ELISA試劑盒 96T48T
人Ⅱ型膠原螺旋肽（HELIX-Ⅱ）ELISA試劑盒 96T48T
人螺旋肽（Helical Peptide）ELISA試劑盒 96T48T
人羥基膠原吡啶交聯(lián)（OH-PYD）ELISA試劑盒 96T48T
人脫氧膠原吡啶交聯(lián)（DPD）ELISA試劑盒 96T48T
人膠原吡啶交聯(lián)（PYD）ELISA試劑盒 96T48T
人溶酶體相關(guān)膜蛋白2（HLAMP-2）ELISA試劑盒 96T48T
人軟骨糖蛋白39（HC gp-39）ELISA試劑盒 96T48T
人天青殺素（AZU）ELISA試劑盒 96T48T
人抗核仁纖維蛋白抗體（AFA/snoRNP/U3RNP）ELISA試劑盒 96T48T
人尿微量白蛋白（ALB）ELISA試劑盒 96T48T

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大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子受體β1（TGF-β1）ELISA試劑盒*

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