1．標準品的制備：是非常復雜的問題，也是標記免疫分析中比較難于制備的一個成分。以下討論的是實驗室標準品（或商品化試劑中標準品）的制備。
1）基質的制備：如前所述，作為標準品的介質（基質）成分應與被測樣品相同。對大多數用于測定血清中某物質的標準品，應用不含被測物質的零血清制備，以求反應的介質環境相當。但有時零值血清的制備十分困難，所以有些標準品用適當的緩沖液制備，并在緩沖液中加入一定量的載體蛋白（一般用1%～2%的牛血清白蛋白），以便使其與樣品的介質環境相近。
零值血清的制備方法有：
（1）吸附法：血清中小分子物質如三碘甲狀腺原氨酸（T3）、甲狀腺素（T4）等，可用活性炭吸附去除。這種方法簡便，但待測物質難以清除干凈，而且大分子活性物質不能用此法進行制備。
（2）反復凍融法：對大分子活性物質可選用低值血清，經反復凍融使被測物質失活。用這種方法可使某些蛋白類激素大部分失活，但也難以得到真正的零值血清。
（3）親和層析法：用特異性抗體制備親和層析柱，用以吸附被測抗原。用這種方法可以得到高質量的零值血清，但本法比較復雜而且成本也高。
2）標準物純品的選擇：應選擇高化學純和高免疫純的純品作標準品。其中免疫純尤為重要，在標準品中不應含有與被測物質有交叉反應的物質。
3）：先用零值血清配置高濃度的標準品，然后根據實驗系統的要求，用零值血清將高值血清稀釋至應有的濃度，制成符合預定要求的，由不同濃度組成的系列標準品。

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