進(jìn)口培養(yǎng)基: 顯色培養(yǎng)基大腸桿菌O157培養(yǎng)基細(xì)菌總數(shù)培養(yǎng)基 *培養(yǎng)基沙門氏菌志賀氏菌培養(yǎng)基弧菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基酵母霉菌青霉曲霉培養(yǎng)基其它培養(yǎng)基李斯特氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基藥品、生物制品檢驗(yàn)培養(yǎng)基臨床檢驗(yàn)培養(yǎng)基其它菌檢測(cè)培養(yǎng)基

抗體: 一抗二抗

食品檢測(cè)試劑盒: 進(jìn)口檢測(cè)試劑盒進(jìn)口檢測(cè)試紙條進(jìn)口PCR檢測(cè)試劑盒 ELISA快速檢測(cè)試劑盒食品與農(nóng)產(chǎn)品安全速測(cè)試劑盒其他檢測(cè)試劑盒

放免試劑盒: 進(jìn)口甲狀腺進(jìn)口腫瘤進(jìn)口糖尿病進(jìn)口心血管進(jìn)口性腺進(jìn)口細(xì)胞因子其它試劑盒進(jìn)口酶聯(lián)免疫試劑盒

免疫化學(xué)產(chǎn)品: 免疫球蛋白抗原純化抗體熒光素標(biāo)記抗體酶標(biāo)記抗體酶標(biāo)親合素及*化抗體免疫血清

其它方法測(cè)試盒: 速率法測(cè)試盒終點(diǎn)法測(cè)試盒比色法測(cè)試盒染液測(cè)試盒其他測(cè)試盒

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小鼠免疫球蛋白EELISA試劑盒使用說(shuō)明書

時(shí)間：2011/3/28閱讀：634

小鼠免疫球蛋白EELISA試劑盒使用說(shuō)明書

檢測(cè)范圍： 96T

4μg/ml -120μg/ml

使用目的：

小鼠免疫球蛋白EELISA試劑盒用于測(cè)定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中免疫球蛋白E（IgE）含量。

實(shí)驗(yàn)原理

小鼠免疫球蛋白EELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠免疫球蛋白E（IgE）水平。用純化的小鼠免疫球蛋白E（IgE）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入免疫球蛋白E（IgE），再與HRP標(biāo)記的免疫球蛋白E（IgE）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白E（IgE）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠免疫球蛋白E（IgE）濃度。

試劑盒組成

1	30倍濃縮洗滌液	20ml×1瓶	7	終止液	6ml×1瓶
2	酶標(biāo)試劑	6ml×1瓶	8	標(biāo)準(zhǔn)品（240μg/ml）	0.5ml×1瓶
3	酶標(biāo)包被板	12孔×8條	9	標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液	1.5ml×1瓶
4	樣品稀釋液	6ml×1瓶	10	說(shuō)明書	1份
5	顯色劑A液	6ml×1瓶	11	封板膜	2張
6	顯色劑B液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1個(gè)

標(biāo)本要求

1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

120μg/ml	5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
60μg/ml	4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
30μg/ml	3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
15μg/ml	2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
7.5μg/ml	1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

小鼠免疫球蛋白EELISA試劑盒注意事項(xiàng)

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請(qǐng)避光保存。

7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

10. 如與英文說(shuō)明書有異，以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。

保存條件及有效期

1． 小鼠免疫球蛋白EELISA試劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6個(gè)月

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小鼠免疫球蛋白EELISA試劑盒使用說(shuō)明書

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