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人轉移因子(TF)elisa試劑盒

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌

廠商性質生產商

所  在  地上海市

聯系方式:柳女士查看聯系方式

更新時間:2015-09-20 10:30:57瀏覽次數:157次

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ELISA試劑盒又稱酶聯免疫試劑盒,是酶免疫測定技術中應用zui廣的技術。上海百蕊生物是國內外專業的ELISA試劑盒生產商和供應商。代理銷售有人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒等。主要指標有白介素系列、趨化因子、生長因子、抑制因子、炎癥因子、營養因子、脂肪因子類等。人轉移因子(TF)elisa試劑盒。

人轉移因子(TF)elisa試劑盒組成:

試劑盒組成

48T

96T

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說明書

1份

1份


封板膜

2片(48)

2片(96)


密封袋

1個

1個


酶標包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

標準品

0.5ml×1瓶

0.5ml×1瓶

2-8℃保存

標準品稀釋液

1.5ml×1瓶

1.5ml×1瓶

2-8℃保存

酶標試劑

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑A液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑B液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

終止液

3ml×1瓶

6ml×1瓶

2-8℃保存

濃縮洗滌液

(20倍)20ml×1瓶

(30倍)20ml×1瓶

2-8℃保存


人轉移因子(TF)elisa試劑盒自備材料:                                 

1. 酶標儀。 

2. 自動或者手工洗板機。 

3. 恒溫箱。 

4. 可調節移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器。 

5. 干凈的試管和Eppendof管。


人轉移因子(TF)elisa試劑盒操作步驟:

1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照圖表在小試管中進行稀 釋。

2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、      待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl, 然后再加待測樣品 10μl(樣品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡 量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此

  重復 5 次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。

7.溫育:操作同 3。

8.洗滌:操作同 5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

    15 分鐘.

10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。


人轉移因子(TF)elisa試劑盒標準曲線的繪制注意事項:

1、樣品的濃度等指標是根據標準曲線計算出來的,所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,否則后面的實驗結果無從談起。

2、設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內,包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線,盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度zui陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內。

3、采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度,ELISA試劑盒這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現較大的偏離。

4、檢測標準樣品時,應按濃度遞增順序進行,以減少高濃度對低濃度的影響,提高準確性。

5、標準曲線的樣品數一般為7個點,但至少要保證有5個點。

6、做出的標準曲線相關系數因實驗要求不同而有所變動,但一般來說,相關系數R至少要大于0.98,對于有些實驗,至少要0.99甚至是0.999.


人轉移因子(TF)elisa試劑盒標準曲線選擇什么擬合方程:


1.在S曲線的低濃度部門可以用乘冪方程很好的擬合,中低濃度部門可以用直線方程,中間部門可用對數方程,而中后段可用四參數。免疫檢測時尺度點(可以是倍比稀釋的,也可以不是)濃度假如和相應的吸光度(OD)值假如能夠呈現直線關系當然是的了,這時可以通過EXELL等利便的獲得擬合曲線,進而推算出樣品的濃度值。


2.關于尺度曲線的擬合方式,直線、二次曲線、三次曲線、指數、對數等雖都可用于ELISA及其它生物學反應中的曲線擬合,但都只合用于曲線的一部門,有的合用于前半段,有的合用于后半段,有的合用于中間一段,而Logistic曲線則對曲線的全部都有較好的合用性。


3.在一個長的區間內,Logistic應該都能擬合得較為理想。假如用來定量,S形曲線的中間段(較陡處)是比較好的,而兩真個平坦部門計算誤差會大,有時甚至會很大。用于免疫檢測的所謂“尺度曲線"實在稱為擬合曲線比較合適。目前上zui流行的免疫檢測擬合方式是“四參數邏輯擬合",用這種擬合方式往往能夠比較精確的反映濃度和吸光度的曲線關系,從而進一步比較準確的獲得樣品中待測物質的濃度值。但我們做免疫檢測很少有時候能夠有這么理想的情況,標品濃度和相應OD值往往是"S"型的曲線關系,這時就不能用直線擬合的方式了,而對擬合方法進行選擇就是必要的了。樞紐在于你的尺度曲線做到了S形的哪一部門,你想檢測的樣品濃度在曲線的哪一部門。當然,假如用于定量,仍是在中間一段較好。但建模型是一回事,ELISA試劑盒而用它來定量是另一回事。這些方法固然沒有一種方法可以通用,但也都可以用。但并不是說它就是*的。事實上不僅是ELISA,其它良多生物學反應都是S形曲線,也都可以用Logistic曲線擬合。


上海百蕊是專業的ELISA試劑盒銷售供應商,有專門的技術部門,全程提供技術指導和免費代測服務,提供售后服務,咨詢。

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