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人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒

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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

聯(lián)系方式:柳女士查看聯(lián)系方式

更新時(shí)間:2015-09-19 09:12:12瀏覽次數(shù):106次

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ELISA試劑盒又稱酶聯(lián)免疫試劑盒,是酶免疫測(cè)定技術(shù)中應(yīng)用zui廣的技術(shù)。上海百蕊生物是國(guó)內(nèi)外專業(yè)的ELISA試劑盒生產(chǎn)商和供應(yīng)商。代理銷售有人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒等。主要指標(biāo)有白介素系列、趨化因子、生長(zhǎng)因子、抑制因子、炎癥因子、營(yíng)養(yǎng)因子、脂肪因子類等。人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒。


人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒組成:


試劑盒組成

48T

96T

保存

說(shuō)明書(shū)

1份

1份


封板膜

2片(48)

2片(96)


密封袋

1個(gè)

1個(gè)


酶標(biāo)包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品

0.5ml×1瓶

0.5ml×1瓶

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5ml×1瓶

1.5ml×1瓶

2-8℃保存

酶標(biāo)試劑

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑A液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑B液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

終止液

3ml×1瓶

6ml×1瓶

2-8℃保存

濃縮洗滌液

(20倍)20ml×1瓶

(30倍)20ml×1瓶

2-8℃保存


人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒自備材料:

1. 酶標(biāo)儀。 

2. 自動(dòng)或者手工洗板機(jī)。 

3. 恒溫箱。 

4. 可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測(cè)樣品較多時(shí),用多通道移液器。 

5. 干凈的試管和Eppendof管。


人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒操作步驟:

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照?qǐng)D表在小試管中進(jìn)行稀 釋。

2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、      待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl, 然后再加待測(cè)樣品 10μl(樣品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡 量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此

  重復(fù) 5 次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。

7.溫育:操作同 3。

8.洗滌:操作同 5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

    15 分鐘.

10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。


人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制注意事項(xiàng):

1、樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出來(lái)的,所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實(shí)驗(yàn)還要重要的一件事,否則后面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)從談起。

2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個(gè)比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測(cè)實(shí)驗(yàn)樣品的濃度,即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi),包括上限和下限。而對(duì)于呈S型的標(biāo)準(zhǔn)曲線,盡量要使實(shí)驗(yàn)樣品的濃度在中間坡度zui陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。

3、采用倍比稀釋法配制標(biāo)準(zhǔn)曲線中的標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度,ELISA試劑盒這樣就能夠保證標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度不會(huì)出現(xiàn)較大的偏離。

4、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)樣品時(shí),應(yīng)按濃度遞增順序進(jìn)行,以減少高濃度對(duì)低濃度的影響,提高準(zhǔn)確性。

5、標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品數(shù)一般為7個(gè)點(diǎn),但至少要保證有5個(gè)點(diǎn)。

6、做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒?yàn)要求不同而有所變動(dòng),但一般來(lái)說(shuō),相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98,對(duì)于有些實(shí)驗(yàn),至少要0.99甚至是0.999.


人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線選擇什么擬合方程:


1.在S曲線的低濃度部門(mén)可以用乘冪方程很好的擬合,中低濃度部門(mén)可以用直線方程,中間部門(mén)可用對(duì)數(shù)方程,而中后段可用四參數(shù)。免疫檢測(cè)時(shí)尺度點(diǎn)(可以是倍比稀釋的,也可以不是)濃度假如和相應(yīng)的吸光度(OD)值假如能夠呈現(xiàn)直線關(guān)系當(dāng)然是的了,這時(shí)可以通過(guò)EXELL等利便的獲得擬合曲線,進(jìn)而推算出樣品的濃度值。 


2.關(guān)于尺度曲線的擬合方式,直線、二次曲線、三次曲線、指數(shù)、對(duì)數(shù)等雖都可用于ELISA及其它生物學(xué)反應(yīng)中的曲線擬合,但都只合用于曲線的一部門(mén),有的合用于前半段,有的合用于后半段,有的合用于中間一段,而Logistic曲線則對(duì)曲線的全部都有較好的合用性。


3.在一個(gè)長(zhǎng)的區(qū)間內(nèi),Logistic應(yīng)該都能擬合得較為理想。假如用來(lái)定量,S形曲線的中間段(較陡處)是比較好的,而兩真?zhèn)€平坦部門(mén)計(jì)算誤差會(huì)大,有時(shí)甚至?xí)艽?。用于免疫檢測(cè)的所謂“尺度曲線"實(shí)在稱為擬合曲線比較合適。目前上zui流行的免疫檢測(cè)擬合方式是“四參數(shù)邏輯擬合",用這種擬合方式往往能夠比較精確的反映濃度和吸光度的曲線關(guān)系,從而進(jìn)一步比較準(zhǔn)確的獲得樣品中待測(cè)物質(zhì)的濃度值。但我們做免疫檢測(cè)很少有時(shí)候能夠有這么理想的情況,標(biāo)品濃度和相應(yīng)OD值往往是"S"型的曲線關(guān)系,這時(shí)就不能用直線擬合的方式了,而對(duì)擬合方法進(jìn)行選擇就是必要的了。樞紐在于你的尺度曲線做到了S形的哪一部門(mén),你想檢測(cè)的樣品濃度在曲線的哪一部門(mén)。當(dāng)然,假如用于定量,仍是在中間一段較好。但建模型是一回事,ELISA試劑盒而用它來(lái)定量是另一回事。這些方法固然沒(méi)有一種方法可以通用,但也都可以用。但并不是說(shuō)它就是*的。事實(shí)上不僅是ELISA,其它良多生物學(xué)反應(yīng)都是S形曲線,也都可以用Logistic曲線擬合。


上海百蕊是專業(yè)的ELISA試劑盒銷售供應(yīng)商,有專門(mén)的技術(shù)部門(mén),全程提供技術(shù)指導(dǎo)和免費(fèi)代測(cè)服務(wù),提供售后服務(wù),咨詢。











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