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572次抗體催化的化學反應:由抗體催化的化學反應特異性高于酶,但催化速率低于常規的酶,只有l0—10倍。但有一些未發現催化劑的反應,如Diels—Alder反應也能被抗體催化。常規酶一般不能催化胺鍵水解,抗體酶能使胺鍵水解的速度增加25萬倍。訖今為止,已發現和證明的由抗體催化的化學反應不下40種。
抗體催化的制備:抗體酶是抗原決定簇處于轉換態結構的抗體。因為轉換態分子極不穩定無法制備抗體,所以催化性抗體的獲得主要是通過設計穩定的轉換態的類似物作為半抗原,與載體蛋白交聯后,免疫動物,獲得針對半抗原的抗體,從中篩選具有催化活性的抗體。篩選催化性單克隆抗體所用的ELISA與篩選一般抗體的方法不*一樣,應根據催化反應的特點而進行適當的修改。經典的方法是先篩選出與底物或半抗原結合的抗體,然后從中再篩選出有催化活力的抗體,這種方法費時費力。利用催化性抗體對底物的催化活性,對底物進行適當修飾,使催化反應的產物可直接表現抗體的催化活性,這樣可以簡化檢測步驟。
轉換態類似物半抗原的設計,必須了解催化反應的轉換態模型的結構特點。催化抗體的抗原結合位點上與轉換態互補的某些催化基團的形成,能穩定轉換態分子。此外有人把單克隆抗體分子用化學修飾方法引入一些活性基團,提高催化性抗體的催化與親和效率。應用噬菌體抗體文庫也可以篩選催化性抗體,可省去制備轉換態類似物的復雜過程,直接用底物從文庫中篩選有催化活性的抗體片段。如用半抗原免疫后制備的文庫或文庫經過多次混雜重組,則可以得到更高的親和力的催化性抗體。抗*型抗體也用于催化性抗體的制備,用酶作為抗原免疫小鼠獲得能夠封閉酶活性位點的單克隆抗體,將這個抗體用蛋白酶除去Fc片段,用Fab免疫其他品系的小鼠或家兔,得到的抗體具有相應的酶催化活性。
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