小鼠細(xì)小病毒(MVM)普遍存在于開(kāi)放飼養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)小鼠群中,呈隱性感染狀態(tài),在某些條件下,可誘發(fā)此病,以致影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。由于小鼠呈隱性感染時(shí),無(wú)臨床癥狀,也無(wú)病理形態(tài)學(xué)的改變,很難分離到病毒,所以血清抗體的檢測(cè)在診斷上有著重要的意義。

    小鼠細(xì)小病毒病是具有高度接觸性的烈性傳染病，既嚴(yán)重威脅著寵物的身體健康，又是對(duì)當(dāng)前我國(guó)畜牧業(yè)、毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)和野生動(dòng)物保護(hù)業(yè)危害較大的疫病。在小鼠細(xì)小病毒病診斷方法中，ELISA檢測(cè)方法方便快捷、費(fèi)用低廉，適于在基層推廣。采用F81細(xì)胞大量擴(kuò)增小鼠細(xì)小病毒CPV-GN株，利用聚已二醇(PEG6000)濃縮后，測(cè)得其蛋白濃度的基礎(chǔ)上。采用倍比稀釋法獲得一系列的蛋白濃度值，同時(shí)將陽(yáng)性血清也倍比稀釋?zhuān)梅疥嚨味ǚㄟM(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)確定了抗原*的包被濃度為9μg／ml；陽(yáng)性對(duì)照的血清稀釋度為1：160。zui適的封閉液為1.75％的明膠，封閉條件為37℃1h；待檢樣品與包被抗原的反應(yīng)時(shí)間為37℃2h：酶標(biāo)二抗的反應(yīng)時(shí)間為37℃1h。經(jīng)過(guò)一系列的驗(yàn)證試驗(yàn)，證明建立的間接ELISA方法具有較強(qiáng)的穩(wěn)定性和特異性。取50份免疫小鼠血清，用該方法與常規(guī)的HI試驗(yàn)分別進(jìn)行抗體檢測(cè)，兩者的共同符合率為94％。其中，明顯陽(yáng)性和陰性的樣品，共同符合率能達(dá)到100％。說(shuō)明建立的間接ELISA方法具有簡(jiǎn)便、快速、特異的優(yōu)點(diǎn)。