圖1.使用StemScale培養基進行大規模擴增。在30次傳代和20周培養中,StemScale培養基每次傳代均可實現10倍以上的細胞擴增(左圖)。與其他供應商的培養基“M"相比,StemScale培養基可在同一時間段內實現高達3倍的擴增(右圖)。
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開啟PSC培養的新維度Gibco StemScale™ PSC懸浮培養基是一種可擴展、易于使用的培養基,支持在懸浮培養中大規模生成人多能干細胞(PSC)。 1.擴增能力—每次傳代可實現5-10倍擴增 2.細胞擴增能力超出其他市售PSC懸浮培養基系統3倍以上 3.簡化的工作流程—提供簡單的培養基更換方案, 4.無需在培養或傳代過程中使用微載體或細胞濾網 5.多種形式的可......
StemScale PSC懸浮培養基
Gibco StemScale™ PSC懸浮培養基是一種可擴展、易于使用的培養基,支持在懸浮培養中大規模生成人多能干細胞(PSC)。該款培養基經過專門配制,可解決當前PSC球 狀體培養系統在聚集方面的技術挑戰。
擴增能力強 —每次傳代可實現5-10倍擴增,細胞擴增能力超出其他市售PSC懸浮培養基系統3倍以上
PSC細胞系間的一致性—在保持多能性和細胞活力的同時實現可靠且一致的球狀體形成
Gibco StemScale PSC懸浮培養基通過球狀體的自聚集進而支持懸浮多能干細胞的生長,非常適合需要大量高質量PSC的應用。
StemScale培養基每次傳代可實現5-10倍擴增,細胞擴增能力超出其他培養基3倍(圖1)。
圖1.使用StemScale培養基進行大規模擴增。在30次傳代和20周培養中,StemScale培養基每次傳代均可實現10倍以上的細胞擴增(左圖)。與其他供應商的培養基“M"相比,StemScale培養基可在同一時間段內實現高達3倍的擴增(右圖)。
圖2.StemScale培養基有助于維持細胞活性和多能性。與其他懸浮培養系統相比,StemScale培養基可在傳代3次后提供*的細胞活性,并且在傳代30次后仍可維持高多能性。
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與貼壁培養相比,在StemScale懸浮培養基中培養PSC球狀體允許用戶在更短的時間內培養更多數量的細胞(表1),同時減少培養基和塑料耗材的消耗量。
從6孔板的單個孔開始,相比貼壁培養,在懸浮培養中生長的細胞在時間和細胞數量方面顯示出明顯差異。
懸浮大規模培養 | 貼壁大規模培養 | |||||
總培養天數 | 培養容器形式 | 平均細胞產量 | 培養基消耗量 | 培養容器形式 | 平均細胞產量* | 培養基消耗量 |
---|---|---|---|---|---|---|
3天 | 6孔板(單孔) | 1.5 x 106 個細胞 | 6 mL | 6孔板(單孔) | 1.5 x 106 個細胞 | 6 mL |
7天 | 6孔板(全板) | 18 x 106 個細胞 | 30 mL | 100 mm 培養皿 | 9 x 106 個細胞 | 48 mL |
11天 | 100 mL 生物反應器 | 150 x 106 個細胞 | 200 mL | 150 mm 培養皿 | 22 x 106 個細胞 | 72 mL |
15天 | 500 mL 生物反應器 | 750 x 106 個細胞 | 1,000 mL | 經處理的Nunc TripleFlask細胞培養瓶 | 78 x 106 個細胞 | 800 mL |
19天 | 3 L 生物反應器 | 4.5 x 109 個細胞 | 6,000 mL | 2層Nunc Cell Factory系統 | 300 x 106 個細胞 | 1,200 mL |
23天 | – | – | – | 10層Nunc Cell Factory系統 | 1.5 x 109 個細胞 | 6,000 mL |
27天 | – | – | – | 30層Nunc Cell Factory系統 | 4.5 x 109 個細胞 | 18,000 mL |
*該值根據每種培養容器形式的4天擴增數據估計得出。3 L生物反應器和30層Thermo Scientific Nunc Cell Factory系統的值根據表中列出的較小生物反應器和Nunc Cell Factory系統形式推斷得出。 |
表1.懸浮培養系統與貼壁培養系統的大規模培養。懸浮培養系統(使用StemScale PSC懸浮培養基)與貼壁培養系統的大規模培養。
圖3.在StemScale培養基中生長的多能干細胞。在StemScale PSC懸浮培養基中接種的多能干細胞可在5天內維持球狀體大小和活性。
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“StemScale培養基能夠改善干細胞球狀體形成的效率。"
—— S. Rieck,ViaCyte
圖4.簡化的工作流程(示意圖)。使用StemScale培養基可輕松使貼壁培養適應到懸浮培養。StemScale培養基允許用戶采用隔日換液的時間方案(如需要)。在StemScale培養基中開始培養后,通過更換50%的培養基以定期每天或隔天一次飼養Gibco游離型iPSC。
圖5.隔日飼養的培養物在倍數變化(A)和多能性(B)方面與每日飼養的培養物相似。
對于在StemScale培養基中培養的4種不同的PSC系,每次傳代均可實現6-11倍擴增,且在15天內可擴增18-28倍。
圖6.懸浮培養系統與貼壁培養系統。懸浮培養系統(使用StemScale PSC懸浮培養基)與貼壁培養系統的大規模培養。
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圖7.球狀體的神經誘導。使用PSC神經誘導培養基(貨號A1647801),直接從StemScale培養基培養的PSC球狀體中誘導大量成熟的神經干細胞。
圖8.直接從StemScale培養基培養的PSC球狀體中誘導多巴胺能神經元。與35天的貼壁培養方案相比,在懸浮培養25天時使用PSC多巴胺能神經元(DA)分化試劑盒(貨號A3147701)從StemScale培養基中分化的DA神經元共表達的FOXA2/Otx2數量相同(數據未顯示)。
圖9.在StemScale培養基中生長的懸浮PSC球狀體分化為心肌細胞。(A)誘導形成心臟前,在StemScale培養基中生長的未分化的hPSC球體形態。(B)心臟誘導開始12天的球狀體。(C)用心臟標記物α橫紋肌肌動蛋白(綠色)和心肌肌鈣蛋白T(紅色)染色心臟類器官。細胞核用DAPI(藍色)復染。
● 規格參數 / SPECIFICATION
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