蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司
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骨髓間充質干細胞在骨髓間充質干細胞成骨誘導分化培養基誘導作用下，會逐漸分化成前成脂細胞和脂肪細胞，將形成大小不一的脂滴。油紅O在脂肪中的溶解度大于其在染液中的溶解度，從而使脂肪著色呈現紅色或橘紅色。產品適用于骨髓間充質干細胞成脂誘導，能提高誘導效率。
骨髓間充質干細胞成骨誘導分化培養基
英文名稱：Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Osteogenic Differentiation Kit
貨號：BMRS-D101
規格：200 mL/Kit
質檢標準 pH：7.2~7.4
內毒素含量：＜10 EU/mL
生物安全：細菌、真菌、支原體檢測陰性
質量檢測：誘導測試合格
Rabbit Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Adipogenic Differentiation Kit
貨號：BMRB-D102
規格：400 mL/Kit
| 使用說明
1. 成脂誘導分化操作
1.1 接種干細胞 取對數生長期的細胞， 按 照 2.0×10e4 cells/cm2 的細胞密度接種至培養器皿，于 37℃， 5% CO2培養環境下培養至匯合度 90~99%，棄掉 上清，加入成脂誘導分化培養基誘導液。
NOTE：如細胞貼壁性較差，建議使用 0.1%明膠對培養底 面進行包被。
1.2 細胞分化誘導 于 37℃，5% CO2培養環境下培養約 3 天，更 換為成脂誘導分化培養基維持液，培養 1 天后， 再更換為成脂誘導分化培養基誘導液，繼續培養 3 天。 按照以上換液頻率誘導 14~21 天，并注意觀 察細胞形態變化。根據細胞誘導形成的脂滴數量 和大小，決定終止細胞誘導的時間，并進行染色 鑒定。
2. 染色鑒定
2.1 細胞固定 吸去培養基使用適量 1×PBS 清洗一次，棄去 后取適量 4%中性覆蓋培養器皿底面，室 溫固定 30~60 min，棄去固定液再使用 1×PBS 清 洗兩次。
2.2 油紅 O 染色 取生理鹽水或1×PBS與油紅O原液配制油紅 O工作液（油紅O原液: 生理鹽水=3:2），現用現 配。配制后可對油紅O工作液進行離心，以沉淀 染色液中的過飽和析出物。向清洗干凈的誘導孔 內加入適量油紅O工作液，靜置染色30min。吸走 油紅O工作液，用1×PBS清洗兩次，并加入適量1 ×PBS避免細胞干燥。
2.3 誘導評估 顯微鏡下觀察成脂染色效果，并進行圖像采 集和誘導評估。誘導成功時，脂滴與油紅 O 染料 結合后呈現紅色或橘紅色。 NOTE: 干細胞的成脂分化水平因細胞類型、細胞供體來 源，培養條件、細胞代次、細胞狀態和分化時間等因素而異。
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