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thp1細胞

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更新時間:2023-06-20 08:12:35瀏覽次數:224次

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產品簡介

細胞名稱:人單核細胞白血*(STR鑒定正確)thp1細胞 細胞別稱:THP1; THP 1; THPI; THP-1(ATCC); O-THP-1;Tohoku Hospital Pediatrics-1貨號:TCH-C361規格:1×10?cells/T25 培養瓶價格:1500元(干冰運輸需另加200元干冰費)

詳細介紹

thp1細胞


細胞名稱: 人單核細胞白血*(STR鑒定正確) thp1細胞

細胞別稱: THP1; THP 1; THPI; THP-1(ATCC); O-THP-1; 

Tohoku Hospital Pediatrics-1

貨號:TCH-C361

規格:1×10?cells/T25 培養瓶

價格:1500元 (干冰運輸需另加200元干冰費)


種屬來源:人

組織來源:外周血

特征:急性單核細胞白血*

細胞形態:單核細胞樣

生長特性:懸浮生長

培養體系:RPMI-1640+10%FBS+0.05 mM β-mercaptoethanol+1%P/S

配套培養基貨號:TCH-G361

傳代比例:1:3-1:6,每2-3天換液一次

傳代周期:24-48 h

培養條件:氣相:95%空氣+5%CO2,溫度:37℃

thp1細胞凍存條件:60%基礎培養基+30%FBS+10%DMSO,液氮儲存

質量檢測:細菌、真菌、支原體檢測均為陰性

thp1細胞

  thp1細胞從一名1歲的急性單核細胞性白血*的男孩的外周血中分離建立。該細胞可以吞噬乳膠顆粒和激活的紅細胞,細胞膜和胞漿內均沒有免疫球蛋白,表達C3R和FcR;可受弗波酯TPA誘導向單核系方向分化;可作為轉染宿主。

  thp1細胞培養要點 

人單核細胞白血*細胞(THP-1)培養注意要點

 1.  THP-1細胞為懸浮生長,部分細胞聚集成團,部分細胞分散;

 2. THP-1細胞更喜歡酸性環境,在偏酸性環境中,THP-1生長更快,所以 當培養基稍微變黃(呈橘紅色)時,是適合細胞生長的,此時補液或半換液即可。

 3. THP-1細胞有密度依賴性,THP-1細胞密度低時,生長較慢,培養密度 維持在4 ~8×10 5 /mL為宜;超過2.0 ×10 6 /mL則需要傳代。

 4. THP-1細胞對機械力較敏感。正常培養時,應盡量避免吹打力道過大。 暴力吹打會使細胞分化和死細胞增加。 

 5. 血清質量差異可能引起細胞狀態變化,建議選用高質量的胎牛血清。 

thp-1細胞培養

人單核細胞白血*細胞(THP-1)換液方法

 1. 補液法:培養基變黃時可補加適量(1~2mL)新鮮培養基,補加1-2次 之后,用離心的方式全部換液,離心1200rpm (約250g)3分鐘。   2.半換液法:以T25瓶子為例,瓶子里裝有5mL培養基。豎起瓶子靜置一 段時間,待細胞沉底,小心吸出2.5mL的培養基,轉移到離心管,離心1200rpm(約 250g)3分鐘,檢查有沒有沉淀,以免損失細胞;原瓶補充2.5mL新鮮培養基, 離心管里若有細胞,則用新鮮培養基重懸后放回原瓶。 

3. 如果換液后第二天培養基就變得很黃,同時鏡下檢查未污染,說明細胞密度大,應該傳代。

人單核細胞白血*細胞(THP-1)傳代方法:

 1. 搖晃培養瓶,把細胞搖勻,均分到兩個瓶子里,每瓶再補充等量培養基。 

 2. 離心法:離心后計數,按照40-50萬細胞/mL的密度接種到T25瓶里,瓶中培養基量以5mL為宜。不方便計數時,按1:2比例傳代。 

 3. 死細胞或細胞碎片較多的情況下,建議用離心法傳代,離心轉速可適當 降低(推薦800~1000rpm或160~200g)。 

 人單核細胞白血病細胞(THP-1)凍存方法


  1. 由于THP-1是懸浮細胞,更易受到凍存影響,建議加大凍存密度,大約 200萬-300萬/mL為宜,以提高復蘇存活率。 
  2. THP-1細胞對凍存溫度比較敏感,建議凍存后立即轉入-80℃冰箱,長 期保存應放在液氮罐中。
     經測試,THP-1使用非程序降溫凍存液的復蘇存活率高于程序降溫凍存液,推薦使用HyCyte™一步凍存液(GUCP-R201)。
thp-1細胞復蘇
 人單核細胞白血*細胞(THP-1)復蘇方法


 THP-1細胞復蘇后通常需要3-5天恢復狀態,建議復蘇后48小時內不要 進行操作。



 人單核細胞白血病細胞(THP-1)常見問題及解決方法:

1.培養基里一定要加β-mercaptoethanol嗎?

 β-mercaptoethanol 是一種常用的培養補充劑,有抗氧化的作用,可減少氧化應激對 THP-1細胞的影響。當細胞密度過大但需要維持時,可適當增加β-mercaptoethanol 的比 例(不超過標準量的1.5倍)。

2.懸浮細胞在鏡下觀察時,難以聚焦或估算密度怎么辦? 

  懸浮細胞會隨著液體流動,不容易聚焦,靜置5-10分鐘使細胞沉底,之后再輕 輕放上顯微鏡觀察,將有助于聚焦和估算細胞密度。 

3.THP-1細胞在培養過程中細胞發生聚團怎么辦? 

 少量細胞聚團,呈葡萄串狀,屬于正常現象,特別是細胞密度較低時,易出現這 種情況。更換血清品牌或增大血清比例(不超過20%)有助于解決聚團問題。不 建議將聚團的細胞吹散,等待密度高時,會自己分散開。 

4. THP-1細胞在培養過程中細胞發生貼壁怎么辦? 

  少量細胞貼壁屬于正常情況,將細胞懸液轉移至新瓶中即可。當貼壁細胞的比例 高于20%,說明細胞生長環境有異常,需排查培養箱設置、培養基成分,以及細胞培養瓶、三角搖瓶是否異常。




參考文獻:

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