蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司
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HyCyt 基因干擾穩轉試劑盒-轉染試劑屬于 二代HyCyte™基因干擾穩轉試劑盒(shRNAx2.0)是基于海星生物的特異SSR重組酶技術開發的基因干擾穩轉試劑盒。產品特點：利用SSR(Site-specific Recombinase)重組酶實現干擾序列DNA載體高效穩轉，其次大幅提升了干擾效率。該轉染試劑盒可以取代病毒實現基因干擾的穩轉株的構建！干擾試劑盒包括了人(Human)和小鼠(Mou......
HyCyte基因干擾穩轉試劑盒-轉染試劑
產品名稱：HyCyte基因干擾穩轉試劑盒-轉染試劑
產品貨號：shRNAx2.0
HyCyte基因干擾穩轉試劑盒-轉染試劑 介紹
該產品屬于二代HyCyte™基因干擾穩轉試劑盒 (shRNAx2.0)是基于海星生物的位點特異性SSR 重組酶技術開發的基因干擾穩轉試劑盒。
HyCyte基因干擾穩轉試劑盒-轉染試劑特點：
該轉染試劑盒利用SSR (Site-specific Recombinase)重組酶實現干擾序列載體高效穩轉，大幅提升了干擾效率。試劑盒的轉染操作與siRNA轉染操作一樣，構建與病毒一樣的基因干擾穩轉細胞株，是新型的基因干擾技術產品。
干擾試劑盒包括了人(Human)和小鼠(Mouse)基因組的所有基因，shRNAx2.0 試劑盒包含2個優選的shRNA干擾序列載體、1個表達 GFP/對照shRNA干擾序列載體和1管位點特異性SSR 重組酶，通過SSR重組酶高效催化shRNA載體整合到細胞的基因組中，實現shRNA 片段的細胞穩轉效果；同時由于SSR重組酶整合效率，shRNA片段在目的細胞基因組大約含有10~100 個拷貝，高拷貝數大幅提升了shRNA片段的表達效果，從而提升了基因的干擾效果。shRNAx2.0載體包含有puro 抗性基因和GFP熒光基因，可以輕松通過熒光判斷干擾載體的轉染效率和目的載體表達效率，并通過Puromycin藥物篩選，獲得高表達的細胞株，輕松建立基因干擾穩轉細胞株。
shRNAx2.0干擾穩轉試劑盒的操作與siRNA轉染過程一樣簡單，對各種細胞都有非常好的干擾效果，也適用于間充質干細胞（MSCs ）等的基因功能研究。
HyCyte基因干擾穩轉試劑盒 優勢特點
HyCyte基因干擾穩轉試劑盒 產品組成
| 產品原理
HyCyte™基因干擾穩轉試劑盒 (shRNAx2.0)的干擾效率與傳統病毒法干擾效率相當。因其SSR重組酶可以構建高拷貝“穩轉"細胞株，同時可以通過藥物篩選到高效、穩定的干擾穩轉細胞株。shRNAx2.0試劑盒是除了病毒法之外可以輕松獲得穩定干擾的穩轉細胞株的實驗方案。
使用HyCyte™基因干擾穩轉試劑盒 (shRNAx2.0)構建干擾穩轉株的周期僅1~2周，便可以拿到長期穩定干擾的細胞株，是大幅提升實驗速度的方案。
| 應用流程
HyCyte™基因干擾穩轉試劑盒 (shRNAx2.0)操作步驟 (脂質體轉染法)：
本試劑盒可以采用的轉染試劑是Lipofectamine® 2000 Reagent (cat#11668-030)，具體參照轉染試劑每種細胞情況。不同類型的轉染試劑，請按照制造商的操作說明進行轉染。
注意：懸浮細胞不推薦使用脂質體轉染法。
HyCyte™基因干擾穩轉試劑盒 (shRNAx2.0)操作步驟(電轉化法)：
本試劑盒可以Neon轉染系統，具體參照設備對每種細胞參數。不同類型的電轉設備，請按照制造商的操作說明進行優化。
注意：懸浮細胞推薦使用電轉化法。
HyCyte™基因干擾穩轉試劑盒 (shRNAx2.0)配有GFP對照shRNA載體，可以按照實際使用的方法和細胞情況，進行實驗摸索，建議48小時后的目的細胞的GFP的陽性率不低于50%， shRNAx2.0試劑盒才能獲得較佳效果。
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