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碧云天-CCK-8試劑盒

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產品型號

品       牌

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所  在  地蘇州市

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更新時間:2022-06-21 10:34:10瀏覽次數:124次

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商鋪產品:842條

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產品簡介

碧云天CCK-8試劑盒,是一種基于WST-8而廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速、靈敏度檢測的試劑盒,比普通的CCK-8試劑盒具有較好的檢測靈敏度和更寬的線性范圍。

詳細介紹

Enhanced Cell Counting Kit-8,簡稱增強型CCK-8試劑盒,是一種基于WST-8 而廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速、靈敏度檢測的試劑盒,比普通的CCK-8試劑盒具有較好的檢測靈敏度和更寬的線性范圍。
WST-8是一種類似于 MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的
formazan(參考圖1) 。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數目呈線性關系。

WST-8檢測原理圖

1. WST-8檢測原理圖 (EC=electron coupling reagent ,即電子耦合試劑 )

WST-8MTT的一種升級替代產品,和MTT或其它 MTT類似產品如XTTMTS等相比有明顯的優點。

 MTT 被線粒體內的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液來溶解;

WST-8 XTT MTS 產生的formazan都是水溶性的,可以省去后續的溶解步驟。

其次, WST-8 產生的formazanXTT MTS 產生的 formazan更易溶解。

再次,WST-8XTT MTS 更加穩定,使實驗結果更加穩定。

另外,WST-8MTT XTT 等相比線性范圍更寬,靈敏度高。
WST-8WST-1 相比,檢測靈敏度更高,更易溶解,并且相對穩定。
本試劑盒可以用于細胞因子等誘導的細胞增殖檢測,也可以用于抗癌藥物等對細胞有毒試劑誘導的細胞毒性檢測,或一些藥物誘導的細胞生長抑制檢測。


C0042
CCK8試劑盒檢測便捷。試劑盒僅一管已經配制好的含有WST-8的增強型 CCK-8溶液,無須再進行任何配制等操作。

無須使用同位素,所有的檢測步驟僅在同一塊 96孔板內完成。不必洗滌細胞,不必收集細胞,也不必采用額外的步驟去溶解 formazan

可以用于大批量樣品的檢測。酚紅和血清對本試劑盒的測定無明顯影響。
WST-8對細胞無明顯毒性。加入增強型CCK-8 溶液顯色后,可以在不同時間反復用酶標儀讀板,使檢測時間更加靈活,便于找到測定時間。
本試劑盒可以測定 2500個樣品。
包裝清單:

產品編號

產品名稱

包裝

C0043

增強型CCK-8溶液

25ml

說明書

1

保存條件:
4℃避光保存一年有效,-20℃避光保存兩年有效。
注意事項:
由于使用 96孔板進行檢測,如果細胞培養時間較長,一定要注意蒸發問題。一方面,由于96孔板周圍一圈最容易蒸發,可以采取棄用周圍一圈的辦法,改加相同量的 PBS 、水或培養液;另一方面,可以把 96孔板置于靠近培養箱內水源的地方,以緩解蒸發。
本試劑盒的檢測依賴于脫氫酶催化的反應,所以還原劑(例如一些抗氧化劑 ) 會干擾檢測,如果待檢測體系中存在較多的還原劑,需設法去除。
用酶標儀檢測前需確保每個孔內沒有氣泡,否則會干擾測定。

使用說明:
1. 通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入 100微升5000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小、細胞增殖速度的快慢等因素決定 )。按照實驗需要,進行培養并給予0-10微升特定的藥物刺激。
2.  每孔加入 10微升增強型CCK-8溶液。如果起始的培養體積為 200 微升,則需加入 20微升增強型CCK-8溶液,其它情況以此類推。可以用加了相應量細胞培養液和增強型 CCK-8 溶液但沒有加入細胞的孔作為空白對照。如果擔心所使用的藥物會干擾檢測,需設置加了相應量細胞培養液、藥物和增強型 CCK-8溶液但沒有加入細胞的孔作為空白對照。
3. 在細胞培養箱內繼續孵育 0.5-4小時,對于大多數情況孵育 1 小時就可以了。時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,初次實驗時可 以在 0.5 1 2 4 小時后分別用酶標儀檢測,然后選取吸光度范圍比較適宜的一個時間點用于后續實驗。
4.  450nm測定吸光度。如無450nm 濾光片,可以使用 420-480nm 的濾光片。可以使用大于600nm的波長,例如 650nm ,作為參考波長進行雙波長測定。
5. 將不同數量的HeLa細胞按照每孔 100 微升培養液接種到 96孔板中,培養至細胞貼壁充分后,每孔加入10微升的增強型 CCK-8 溶液孵育 2小時后測定A450的檢測效果圖參考圖 2 。檢測效果僅供參考,實測數據會因檢測儀器等的不同而存在差異。

CCK-8
2. 增強型CCK-8 試劑盒測定不同數量HeLa 細胞的檢測效果圖。實測數據會因檢測儀器等的不同而存在差異,圖中數據僅供參考。


常見問題:
1. 增強型CCK-8溶液對細胞的毒性大小如何?
增強型CCK-8 溶液對細胞的毒性非常低,和普通的CCK-8溶液相當或者毒性更低,通常觀察不到細胞毒性。細胞在 CCK-8法檢測后仍然可以正常生長,并以用于 其它的細胞實驗。但為了避免增強型 CCK-8溶液可能帶來的對于后續檢測的影響,除非該細胞極難獲得,否則不推薦把增強型CCK-8 溶液孵育過的細胞用于其它 實驗。
2. 如果吸光度值太低,可以采取什么辦法?
a. 適當增加細胞數量。
b. 延長加入增強型CCK-8 溶液后的孵育時間。
相關產品:


產品編號

產品名稱

包裝

C0009

MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒

500

C0035

WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒

100

C0036

WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒

500

C0037

Cell Counting Kit-8(CCK-8試劑盒)

100

C0038

Cell Counting Kit-8(CCK-8試劑盒)

500

C0039

Cell Counting Kit-8(CCK-8試劑盒)

2500

C0040

Cell Counting Kit-8(CCK-8試劑盒)

10000

C0041

Enhanced Cell Counting Kit-8(增強型CCK-8試劑盒 )

100

C0042

Enhanced Cell Counting Kit-8(增強型CCK-8試劑盒 )

500

C0043

Enhanced Cell Counting Kit-8(增強型CCK-8 劑盒 )

2500

C0046

Enhanced Cell Counting Kit-8(增強型CCK-8試劑盒 )

10000

本產品于專業人員的科學研究用,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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關鍵詞:酶標儀 培養箱

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