蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司
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所 在 地蘇州市
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更新時間：2022-06-21 10:26:24瀏覽次數(shù)：115次
聯(lián)系我時，請告知來自 儀表網(wǎng)天根TIANScriptⅡcDNA試劑盒 適用范圍：1. cDNA鏈的合成； 2. cDNA文庫的構(gòu)建； 3.一步法RT-PCR； 4. RACE分析。
天根TIANScriptⅡcDNA試劑盒-qpcr試劑盒-逆轉(zhuǎn)錄試劑盒-KR107
產(chǎn)品簡介：
本試劑盒提供了所有的用于cDNA鏈合成的試劑，其中的TIANScriptⅡRTase為改良后的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MLV），改良后的新RTase具有更高的模板親和力和更低的RNase H活性，因此使其在cDNA條鏈的合成過程中具有通讀復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)模板和反轉(zhuǎn)錄長片段cDNA的能力。產(chǎn)品中配備的5×TIANScriptⅡRTase Buffer經(jīng)過精心的優(yōu)化，既保證了新型RTase的高效酶活，又拓寬了RNA模板量的加入范圍，使得反轉(zhuǎn)錄出來的cDNA利于后續(xù)的實驗分析。
■ 酶活效率高：效率高的反轉(zhuǎn)錄酶活性，后續(xù)實驗兼容性好。
■ 底物范圍廣：適用于所有RNA，尤其是具有復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)的RNA 模板。
■ 反轉(zhuǎn)片段長：cDNA 鏈合成可以達到12 kb。
■ 操作簡單：只需一步添加所需成分，無需中間加入其他試劑。
天根TIANScriptⅡcDNA試劑盒適用范圍：
1. cDNA鏈的合成；
2. cDNA文庫的構(gòu)建；
3. 一步法RT-PCR；
4. RACE分析。
實驗步驟：
注意事項：請務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項。
1. 用于cDNA合成反應(yīng)的溶液試劑盡可能用DEPC進行處理，并在高壓滅菌后使用。有些試劑不能高壓滅菌時，用經(jīng)過滅菌的器具、水等配制溶液后，再將溶液進行濾除菌處理。
2. RNA樣品要避免基因組DNA污染；
3. 避免反復(fù)凍融RNA，使RNA保持在冰浴中處融化狀態(tài)；
4. 試劑盒中各組分成分應(yīng)在-20℃保存；
5. 在使用Random Primer時，要注意隨機引物量和總RNA量之間的關(guān)系，一般建議50 ng隨機引物/5 ug總RNA。當(dāng)提高Random/RNA的比率將會提高短片段（～500 bp）cDNA的合成；而當(dāng)降低Random/RNA的比率將會提高長片段cDNA的合成；
6. 如果模板RNA富含二級結(jié)構(gòu)，可以先在65℃條件下處理5min；
7. 如果反轉(zhuǎn)錄中使用PCR下游引物，為了防止引物錯配導(dǎo)致的非特異擴增，可以在50℃條件下進行反轉(zhuǎn)錄；
8. 在進行長片段擴增時，為了防止cDNA結(jié)果被破壞，建議以70℃下處理15 min為酶滅活條件；
9. 當(dāng)使用酶類時，應(yīng)輕輕混勻，避免起泡；分取之前要小心地離心收集到反應(yīng)管底部，由于酶粘度高，吸取時應(yīng)慢慢吸取。
注意：如果要擴增長片段，需使用新鮮提取所得的完整性好、純度高的RNA。
儲存條件
本產(chǎn)品中的各成分可在-20℃條件下保存1年。
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