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蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司


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Smartaroe 瓊脂糖凝膠過(guò)濾基質(zhì)填料

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地蘇州市

聯(lián)系方式:耿少華查看聯(lián)系方式

更新時(shí)間:2022-06-21 10:16:55瀏覽次數(shù):140次

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經(jīng)營(yíng)模式:經(jīng)銷商

商鋪產(chǎn)品:842條

所在地區(qū):江蘇蘇州市

聯(lián)系人:耿少華 (經(jīng)理)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

Smartaroe是一種球形瓊脂糖凝膠過(guò)濾基質(zhì),Smartaroe4B和Smartaroe6B的瓊脂糖含量分別為4%和6%oSmartaroeCL凝膠是Smartaroe4B和Smartaroe6B的衍生物,化學(xué)和物理性能更優(yōu)異,流速更快。

詳細(xì)介紹


Smartarose是一種球形瓊脂糖凝膠過(guò)濾基質(zhì),Smartarose 4B和Smartarose 6B的瓊脂糖含量分別為4%和6%o Smartarose CL凝膠是 Smartarose 4B和Smartarose 6B的衍生物,化學(xué)和物理性能更優(yōu)異,流速更快。Smartarose CL凝膠耐有機(jī)溶劑,因此適合在有機(jī)溶劑 中分離物質(zhì)。Smartarose和Smartarose CL分離范圍較廣,適合對(duì)分子量不同的樣品進(jìn)行表征或分離。


瓊脂糖凝膠填料性能

項(xiàng)目

性能

Smartarose 瓊脂糖 分離范圍 粒徑 推薦線性流速* (cm/h) pH穩(wěn)定性**

4B 6B CL-4B CL-6B

4% 6% 4% 6%

70x103-20x106 1Qx103 -4x106 70x103-20x106 10x10 3-4x106

45-165 pm

11 cm/h 14 cm/h 26 cm/h 30 cm/h

4-9 4-9 3-13 3-13

耐受凝膠層析常用溶液,如8 M尿素、6 M 鹽酸

試劑耐受

耐受凝膠層析常用溶液,如8 M尿素、6M鹽酸 Mo也耐受乙醇、DMFTHE 丙酮、DMS 弧。 氯仿、二氯甲烷、二氯乙烷、卩比卩定、磷酸三乙

酯和乙月青等有機(jī)溶劑。

物理性能 滅菌

pH或離子強(qiáng)度變化引起的體積變化可以忽略不計(jì)

化學(xué)方法 水蒸氣高壓滅菌,120°C, 20 min

   pH范圍是我們根據(jù)實(shí)驗(yàn)和經(jīng)驗(yàn)估算的。請(qǐng)注意:pH長(zhǎng)期穩(wěn)定性是指凝膠在長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)其層析性能不會(huì)改變的pH范圍。pH短期穩(wěn)定性是指凝膠再生和清洗時(shí)穩(wěn)定的pH范圍。

裝柱說(shuō)明:

介質(zhì)保存于20%乙醇。裝柱前建議將20%乙醇抽濾去除,置換成去離子水。

將75%介質(zhì)和25%去離子水混句,真空負(fù)壓脫氣。不要使用粘性試劑裝柱。裝柱完成后,可以用粘性緩沖液低流速平衡層析柱。

2.2介質(zhì)裝填

裝柱方法有兩步,第二步應(yīng)在恒壓下進(jìn)行,柱壓見(jiàn)表2。凝膠層析的分辨率隨柱床高度的增加而增加。因此,柱床高度在60 cm以上。

表2.推薦裝柱流速和壓力

介質(zhì)

步驟1

流速(cm/h)

步驟2

壓力(MPa.bar.Psi)

Smartarose 4B

15

0.018,0.18,2.6

Smartarose 6B

30

0.025,0.25,3.6

Smartarose CL-4B

30

0.025,0.25,3.6

Smartarose CL-6B

30

0.045,0.45,6.4

層析柱的裝填(使用儲(chǔ)液器裝填)

裝柱前根據(jù)層析柱直徑計(jì)算柱子底面積,根據(jù)所需裝柱高度計(jì)算所需介質(zhì)體積,公式如下: V = 1.157ir2h

 

V:所需介質(zhì)體積ml

1.15:壓縮系數(shù)(不同介質(zhì)壓縮系數(shù)不同)

r:柱管半徑cm

h:裝填高度cm

1) 用去離子水沖洗層析柱底篩板與接頭,確保柱底篩板上無(wú)氣泡,關(guān)閉柱底出口,并在柱底部留出1-2 cm的去離子水。

2) 將填料懸浮起來(lái),小心的將漿液連續(xù)地倒入層析柱中。用玻璃棒沿著柱壁倒入漿液可減少氣泡的產(chǎn)生。

3) 如果使用儲(chǔ)液器,應(yīng)立即在層析柱和儲(chǔ)液器中加滿水,將進(jìn)樣分配器放置于漿液表面,連接至泵上,避免在分配器或進(jìn)樣管中產(chǎn)生氣泡。

4) 打開(kāi)層析柱底部出口,開(kāi)啟泵,使其在設(shè)定的流速下進(jìn)行。最初應(yīng)讓緩沖液緩慢流過(guò)層析柱,然后緩慢增加至最終流速,這樣可避免液 壓對(duì)所形成柱床的沖擊,也可以避免柱床形成的不均勻。如果達(dá)不到推薦的壓力或流速,可以用你所使用泵的流速,這樣也可以得到 一個(gè)很好的裝填效果。(注意:在隨后的色譜程序中,不要超過(guò)裝柱流速的75%)當(dāng)柱床高度穩(wěn)定后,在最后的裝柱流速下至少再上2 倍柱床體積的去離子水。標(biāo)上柱床高度。

5) 關(guān)閉泵,關(guān)閉層析柱出口。

6) 如果使用儲(chǔ)液器,去除儲(chǔ)液器,將分配器置于層析柱中。

7) 將分配器推向柱子至標(biāo)記的柱床高度處。允許裝柱液進(jìn)入分配器,鎖緊分配器接頭。

8) 將裝填好的層析柱連接至泵或色譜系統(tǒng)中,開(kāi)始平衡。如果需要可以重新調(diào)整分配器。

2.3柱效測(cè)試

為了檢驗(yàn)層析柱的質(zhì)量,應(yīng)進(jìn)行柱效測(cè)試,以確定理論塔板數(shù)和峰不對(duì)稱系數(shù)。

洗脫液:去離子水

樣品:2% (v/v)丙酮水溶液或者1 M NaCI溶液

如圖1所示計(jì)算理論塔板數(shù),用如下公式:N/m = 5.54 (VrM)2 x 1000/L

計(jì)算峰不對(duì)稱系數(shù)(AS)公式如下:AS = b/a (如圖1所示)

 瓊脂糖凝膠

 

3 .純化流程

3.1緩沖液的準(zhǔn)備

所用水和緩沖液在使用之前建議用0.22 pm或0.45 pm濾膜過(guò)濾。

平衡液為蛋白純化后,用于保護(hù)蛋白的溶液,根據(jù)客戶需求自行選擇。

3.2樣品準(zhǔn)備

樣品在上樣前建議離心或用0.22 pm或0.45|jm濾膜過(guò)濾,減少雜質(zhì),防止堵塞柱子。

3.3樣品純化

1) 平衡

上樣之前,用平衡液至少平衡兩個(gè)柱體積,或直到基線穩(wěn)定。含去垢劑的溶液可能需要平衡更長(zhǎng)時(shí)間。

2) 上樣

推薦上樣體積為柱體積的2-5%o可以通過(guò)上樣管或樣品環(huán)來(lái)上樣。純化流速不能超過(guò)裝柱流速的70%0

3) 再生

再生通常用水沖洗2倍柱體積,然后用緩沖液沖洗2-3倍柱體積,如果不立刻使用,則用20%乙醇平衡后,4-30°C保存。對(duì)不同的樣品, 建議大約5次循環(huán)后,采用完整的在位清洗(CIP)o

4.清洗及保存

4.1 CIP (Cleaning In Place)清洗

CIP是去除以前生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生的結(jié)合過(guò)緊密、沉淀或變性的物質(zhì)。在某些情況下,介質(zhì)再生后,月謳或變性蛋白跡物質(zhì)仍可育誡留茁掃=o 需要制鵰料中已知污染I刎樓來(lái)設(shè)H特定的CIP程序。

當(dāng)出現(xiàn)下列情況,需要對(duì)介質(zhì)進(jìn)行在位清洗:

?柱壓增高;

?填料顏色變化明顯;

?分辨率降低;

?上接頭與凝膠表面之間出現(xiàn)空隙;

?如果反壓增高,在介質(zhì)清洗前檢查閥門、管線等中止情況。

1) 去除非特異性結(jié)合蛋白和脂蛋白

用0.5 M NaOH清洗一個(gè)柱體積,去離子水或緩沖液平衡至中性,流速40 cm/ho

2) 去除一些沉淀或變性物質(zhì),建議使用下面的方法

用4倍柱體積的1.0-2.0 M NaOH溶液,流速40 cm/h對(duì)介質(zhì)進(jìn)行清洗,然后立即用2-3倍柱體積的水清洗。

3) 去除一些強(qiáng)結(jié)合的疏水蛋白

用4-10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗(使用有機(jī)溶劑要梯度清洗,避免起泡)或者用含去垢劑的酸或中性溶液。比如,用1 M 醋酸溶液含0.5%非離子型去垢劑,清洗流速40 cm/h。隨后用70%乙醇沖洗5個(gè)柱體積洗去殘留去垢劑。

4.2保存

CIP之后的介質(zhì)如果不使用可以用20%乙醇,4 -30°C保存。

5 .訂購(gòu)信息及相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品名稱

貨號(hào)

規(guī)格

 

SEC0060

25 ml

 

SEC0061

100 ml

Smartarose 4B

SEC0062

500 ml

 

SEC0063

1 L

 

SEC0064

10 L

 

SEC0070

25 ml

 

SEC0071

100 ml

Smartarose 6B

SEC0072

500 ml

 

SEC0073

1 L

 

SEC0074

10L

 

SEC0080

25 ml

 

SEC0081

100 ml

Smartarose CL-4B

SEC0082

500 ml

 

SEC0083

1 L

 

SEC0084

10L

 

SEC0090

25 ml

 

SEC0091

100 ml

Smartarose CL-6B

SEC0092

500 ml

 

SEC0093

1 L

 

SEC0094

10 L


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