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非洲豬瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒[風途配件提供]

閱讀:275      發布時間:2021-7-14
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  非洲豬瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒[風途配件提供]FT-ZWSJ2frikansk svinpestvirus fluorescerande PCR-detektionssats在豬的方面,養豬人在引種時一定要注意隔離和檢測,且平時要做好相關的排查工作,如果發現豬只出現體表發紺、耳朵或體表出現紫斑、毛孔出血、厭食、腹瀉等癥狀時,要提高警惕,好是采樣送到相關的非洲豬瘟檢測實驗室進行檢測。非洲豬瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒

  【產品名稱】

  通用名稱:病毒*

  英文名稱:Extraction Kit for Virus DNA

  【預期用途】

  本試劑盒主要用于疑似病毒等病原感染抗凝血、血淸、拭子、組織、飼料及環境中的病毒DNA的提取,純化的核酸可適用于各種常規操作及PCR試驗。

  【試劑盒組分】

  I、試劑盒組成及貯藏條件

名稱

20 T

50 T

1、吸附柱

20個

50個

2、收集管

20個

50個

3、裂解液

5 mL

11 mL

4、洗液I

13 mL

32 mL

5,洗液II

13 mL

32 mL

6.洗脫液

1.2 mL

3 mL

  2、 保存條件及有效期:室溫下保存,有效期12個月.

  3、 需自備材料:無水乙醇、1.5 mL無菌離心管、1.5 mL無菌離心管(長臂型)、生理鹽水、研缽、無菌

  1mL, 2OOuL、10uL槍頭、記號筆等。

  【操作步驟】

  一、樣品制備

  1、 血液樣品:抗凝血樣品置離心管中,8000轉/分鐘離心2分鐘,取上層血漿;非抗凝血樣品置離心 管中,待凝固后,8000轉/分鐘離心2分鐘,取上層血清,置于滅菌離心管中,編號待檢。

  2、 組織樣品:采集脾臟、肝臟、淋巴結、扁桃體等病變組織樣品0.1g.組織勻漿器或研缽中充分勻漿或研磨,加入1 mL生理鹽水混勻,8000轉/分鐘離心2分鐘,取上清于滅菌離心骨中,編號待檢。

  3、 口腔液:進食前用拭子/口腔液采集袋或自制棉線綁紗布團吸引動物咀嚼,收集口腔液大于 500uL, 8000轉/分鐘離心2分鐘,取上清于滅菌離心管中,編號待檢。

  4、 飼料:取適量研磨后的飼料(約0.2g),放入含1 mL生理鹽水或PBS(PH為7.4)緩沖液的2 mL EP 管屮,振蕩混勻,8000轉/分鐘離心2分鐘,取上清于滅菌離心管中,編號待檢.

  5、 灰塵:用無菌棉簽蘸取適量環境表面上的灰塵,放入含1 mL生理鹽水或PBS(PH為7.4)緩沖液的2 mL EP管中,振蕩混勻,8000轉/分鐘離心2分鐘,取上清于滅菌離心管中,編號待檢。

  二、DNA的提取

  1、取裂解液200uL加入無核酸酶1.5 mL離心曾屮,分別加入血漿/血清/組織液等樣品液200uL. 震蕩混勻10秒或顛倒混勻10次,室溫放置5分鐘(如果室內溫度較低時.需放置25C水浴溫育),再加入200uL無水乙醇,顛倒混勻10秒;若樣品渾濁則先12000轉/分鐘離心1分鐘處理,取上清液,以避免堵塞柱子;

  2、 將液體轉入套有收集管的吸附柱中, 12000rpm離心1分鐘:

  3、 棄收集管液體,向吸附柱中加600uL洗液I , 12000 rpm離心1分鐘;

  4、 棄收集管液體,向吸附柱中加600uL洗液II, 12000 rpm離心I分鐘;

  5、 棄收集管液體,12000 rpm離心2分鐘,以*去除殘留洗液;

  6、將吸附柱轉入新的無核酸酸1.5mLEP管(長臂型)中,向柱滴加50 uL洗脫液,靜置1分鐘, 12000 rpm離心1分鐘,EP管中液體即為病毒DNA。

  【注意事項】

  1、 實驗前諾仔細閱讀本試劑盒說明書,嚴格按照操作步驟執行.在操作過程中對時間、試劑體積等 粘確控制可以獲得好的結果。

  2, 樣本應新鮮采集使用,或低溫運輸儲存;

  3, 樣本具有潛在感染風險,核酸的提取應在核酸提取實驗室的生物安全柜中進行。

  4、 核酸提取冇關耗材確保高溫滅菌,提取后核酸盡快進入下一步試驗或冷凍保存待用。

  5, 試劑使用前應混合均勻,試劑具有一定腐蝕性,使用時請戴手套、做好防護。

  6. 低溫下裂解液出現結晶數屬正?,F象,可在60°C水浴加熱助溶后使用。

  7、 實驗產生的廢棄物應及時收集,遠離PCR實驗室進行無害化處理。

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