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酶標(biāo)儀(Enzyme-linked Immunosorbent Assay，ELISA)是一種常用的生物化學(xué)分析技術(shù)，用于檢測(cè)和定量分析樣品中特定分子(如蛋白質(zhì)、抗體、激素等)的存在和濃度。它的主要用途包括醫(yī)學(xué)診斷、生物學(xué)研究、食品安全監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。
酶標(biāo)儀的工作原理基于酶的特異性反應(yīng)和光學(xué)檢測(cè)。一般來(lái)說(shuō)，酶標(biāo)儀的操作步驟包括以下幾個(gè)關(guān)鍵步驟：
涂覆：將待檢測(cè)物(如抗原或抗體)固定在試驗(yàn)板上，形成一個(gè)涂層。
阻斷：加入阻斷試劑，防止非特異性結(jié)合。
反應(yīng)：加入待檢測(cè)樣品，使樣品中的目標(biāo)分子與涂層上的特異性抗體結(jié)合。
洗滌：通過(guò)洗滌步驟去除非特異性結(jié)合物。
探針：加入與目標(biāo)分子結(jié)合的酶標(biāo)記物(如酶標(biāo)記的抗體)，形成復(fù)合物。
洗滌：再次洗滌去除未結(jié)合的酶標(biāo)記物。
底物添加：加入底物，使酶標(biāo)記物催化反應(yīng)生成可測(cè)量的信號(hào)物質(zhì)(如發(fā)光、顏色變化等)。
讀數(shù)：使用酶標(biāo)儀測(cè)量信號(hào)的強(qiáng)度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線或計(jì)算得出待檢測(cè)物的濃度。
酶標(biāo)儀的工作原理基于特異性的抗體-抗原相互作用以及酶對(duì)底物的催化反應(yīng)。通過(guò)測(cè)量底物反應(yīng)生成的信號(hào)物質(zhì)的光學(xué)性質(zhì)，如吸光度、發(fā)光強(qiáng)度或顏色變化，可以間接地推測(cè)出樣品中目標(biāo)分子的存在和濃度。
酶標(biāo)儀具有高靈敏度、高特異性和廣泛的應(yīng)用范圍，因此被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)診斷、生物學(xué)研究和食品安全監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。
